Producción de proteínas bacterianas

Características importantes en la producción de proteínas

• La cantidad de proteína producida por lote de fermentación es crucial, ya que un mayor rendimiento reduce el costo por unidad de masa y hace que el proceso sea más eficiente.

Promotores

• Un promotor es un componente del plásmido que puede modificarse para modular el nivel de expresión de la proteína recombinante.
• Existen diferentes tipos de promotores, cada uno con sus características y condiciones de expresión:
• Promotor Lac: genera un nivel muy alto de ARNm solo en condiciones de inducción (IPTG).
• Promotor Izquierdo lambda PL: tiene un sitio de unión para el represor lambda, y se expresa solo cuando se elimina el represor.
• Promotor T7: es uno de los promotores más potentes conocidos, y solo es transcrita por la ARN polimerasa del bacteriófago T7.

Terminador

• Un terminador es una secuencia de nucleótidos que determina el desprendimiento de la ARN polimerasa de la cadena plantilla de ADN, lo que ocurre hacia el final del proceso de transcripción.
• Existuen dos categorías de mecanismos de terminación de la transcripción en procariotas: dependientes de Rho y independientes de Rho.
• Los plásmidos de expresión bacteriana comunes utilizan terminadores independientes de Rho, como T7 y rrnB.

Sitio de unión del ribosoma (RBS)

• Un sitio de unión a ribosoma (RBS) es una secuencia de nucleótidos adyacente al codón de inicio de una transcripción de ARNm.
• La función principal de esta secuencia es el reclutamiento de un ribosoma durante el inicio de la traducción de proteínas.
• El RBS controla la precisión y eficiencia con la que comienza la traducción del ARNm, y también se le llama secuencia de Shine-Dalgarno.