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Questions and Answers

Quale dei seguenti elementi è il costituente principale, in termini di percentuale del peso secco, del materiale cellulare batterico?

  • Fosforo
  • Carbonio (correct)
  • Zolfo
  • Azoto

In che modo i batteri eterotrofi ottengono il carbonio necessario per la crescita?

  • Utilizzando composti inorganici come fonte di carbonio.
  • Fissando direttamente l'azoto atmosferico.
  • Convertendo la luce solare in energia chimica.
  • Assimilando composti organici. (correct)

Quale processo è essenziale affinché i microrganismi che utilizzano fonti di azoto diverse dall'ammoniaca possano incorporare l'azoto in molecole organiche?

  • Denitrificazione
  • Riduzione assimilativa (correct)
  • Fissazione dell'azoto
  • Ammonificazione

Qual è la funzione principale dei macronutrienti nella cellula batterica?

<p>Sintetizzare macromolecole mediante consumo di energia. (A)</p>
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Quale elemento, tra quelli elencati, è più comunemente utilizzato come accettore di elettroni nella respirazione aerobica?

<p>Ossigeno (B)</p>
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Quale delle seguenti affermazioni descrive meglio la funzione dei fattori di crescita per i batteri?

<p>Sono composti organici che i batteri devono acquisire dall'ambiente perché non possono sintetizzarli. (B)</p>
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Cosa distingue i prototrofi dagli auxotrofi?

<p>I prototrofi possono sintetizzare tutti i loro componenti cellulari da una singola fonte di carbonio, mentre gli auxotrofi richiedono fattori di crescita aggiuntivi. (C)</p>
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Quale meccanismo di trasporto attraverso la membrana cellulare batterica richiede energia metabolica (idrolisi di ATP, energia fotochimica o ossidoriduzioni)?

<p>Trasporto primario (C)</p>
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Qual è il ruolo delle porine nella membrana esterna dei batteri Gram-negativi?

<p>Formano canali che permettono la diffusione di specifiche molecole. (A)</p>
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Quale processo di trasporto comporta la modifica chimica di una molecola durante il suo passaggio attraverso la membrana cellulare?

<p>Traslocazione di gruppo (B)</p>
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Cosa si intende con il termine "tempo di generazione" in microbiologia?

<p>Il tempo impiegato da una popolazione batterica per raddoppiare il proprio numero. (C)</p>
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Se una coltura batterica ha un tempo di generazione di 30 minuti, quanto tempo impiegherà una singola cellula a produrre una popolazione di più di 500 cellule, assumendo condizioni ottimali?

<p>Circa 4,5 ore (B)</p>
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Qual è la caratteristica principale della fase di latenza (lag) nella curva di crescita batterica?

<p>Adattamento delle cellule all'ambiente, senza aumento significativo del numero di cellule. (B)</p>
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In quale fase della curva di crescita batterica il numero di cellule che si dividono è all'incirca uguale al numero di cellule che muoiono?

<p>Fase stazionaria (D)</p>
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Cosa rappresenta una curva diauxica osservata nella crescita batterica?

<p>La crescita batterica caratterizzata da due fasi esponenziali distinte dovute all'utilizzo sequenziale di due diverse fonti di carbonio. (C)</p>
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Qual è il vantaggio principale dell'utilizzo di un chemostato nella coltura continua di batteri?

<p>Mantenere una coltura in fase esponenziale per un periodo prolungato offrendo condizioni ambientali stabili. (C)</p>
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In un chemostato, cosa succede se il tasso di diluizione supera la capacità di crescita dei batteri?

<p>La coltura va incontro a 'washout', ovvero le cellule vengono dilavate via più velocemente di quanto possano riprodursi. (C)</p>
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Qual è la funzione primaria dei terreni di coltura minimi?

<p>Supportare la crescita di microrganismi con requisiti nutrizionali specifici e limitati. (A)</p>
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Quale tipo di terreno di coltura è progettato per consentire la crescita di alcuni microrganismi, inibendo la crescita di altri?

<p>Terreno selettivo (C)</p>
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In un terreno di coltura differenziale, cosa permette di distinguere tra diversi tipi di batteri?

<p>La capacità di alcuni batteri di produrre colonie colorate a causa di reazioni specifiche. (B)</p>
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Qual è il principio alla base del metodo di conta microbica noto come 'Most Probable Number' (MPN)?

<p>Stima statistica del numero di microrganismi in un campione, basata sulla presenza o assenza di crescita in una serie di diluizioni. (B)</p>
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Qual è uno dei principali limiti del conteggio diretto al microscopio delle cellule batteriche?

<p>È difficile distinguere tra cellule vive e morte. (A)</p>
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La misurazione della torbidità di una coltura batterica è un metodo per stimare la densità cellulare. Qual è il principio su cui si basa questa tecnica?

<p>La torbidità aumenta proporzionalmente alla concentrazione di cellule batteriche che diffondono la luce. (B)</p>
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Qual è una limitazione della misurazione della torbidità come metodo per determinare la crescita batterica?

<p>Non distingue tra cellule vive e morte, e la relazione tra torbidità e numero di cellule può variare. (B)</p>
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Qual è la principale limitazione dell'utilizzo di camere di conta, come quelle di Petroff-Hausser o Burker, per la conta delle cellule batteriche?

<p>Non permettono di distinguere tra cellule vive e cellule morte. (C)</p>
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Come avviene la crescita microbica per scissione binaria?

<p>La cellula madre si allunga, replica il suo DNA e si divide in due cellule figlie identiche. (D)</p>
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Quale dei seguenti elementi è un anione cellulare essenziale nei batteri?

<p>Cloro (D)</p>
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Quale di questi micronutrienti è un componente della vitamina B12?

<p>Cobalto (C)</p>
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I batteri che usano il carbonio inorganico come fonte di carbonio sono chiamati:

<p>Autotrofi (C)</p>
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Quale tra i seguenti è un esempio di terreno selettivo?

<p>V.R.G.B. (Violet Red Bile Glucose Agar) (C)</p>
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Nel contesto dei terreni di coltura, cosa indica il termine 'agarizzato'?

<p>Presenza di agar per solidificare il terreno. (A)</p>
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Nei terreni differenziali, quale caratteristica permette di distinguere tra specie batteriche?

<p>Variazioni di caratteristiche metaboliche o morfologiche. (A)</p>
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Quale terreno di coltura è usato per l'isolamento e l'identificazione di Pseudomonas aeruginosa?

<p>Agar cetrimmide (D)</p>
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Cosa si intende per beta-emolisi in un terreno agar sangue?

<p>Emolisi totale (D)</p>
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Qual è lo scopo principale del trapianto in microbiologia?

<p>Ottenere buone crescite batteriche. (A)</p>
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Quale tecnica di laboratorio è utilizzata per ottenere colonie singole al fine di verificarne la forma e la purezza?

<p>Isolamento (D)</p>
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Nelle tecniche di diluizione seriale per la conta microbica, perché è importante evitare di usare l'espressione '1 ml in 10 ml'?

<p>Perché introduce un errore nella diluizione. (B)</p>
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Quale metodo di conteggio microbico stima il numero delle cellule vitali capaci di proliferare usando terreni selettivi?

<p>MPN (Most Probable Number) (D)</p>
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Quale dei seguenti elementi è cruciale per la crescita batterica perché partecipa alla costruzione di acidi nucleici e fosfolipidi?

<p>Il fosforo (B)</p>
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Quale dei seguenti meccanismi di trasporto richiede una proteina periplasmica con alta affinità per il substrato?

<p>Trasporto primario (C)</p>
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In un sistema di trasporto attivo secondario, quale ruolo svolge il gradiente elettrochimico?

<p>Guida il movimento del soluto contro il suo gradiente di concentrazione grazie all'energia potenziale. (B)</p>
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Quale delle seguenti affermazioni descrive meglio il processo di traslocazione di gruppo?

<p>Trasporto di una molecola attraverso la membrana con contemporanea modificazione chimica. (B)</p>
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Qual è la relazione tra il tempo di generazione (T) e il tasso di crescita specifico in una coltura batterica?

<p>Sono inversamente proporzionali: un aumento del tempo di generazione indica un tasso di crescita più lento. (D)</p>
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Se una coltura batterica in fase esponenziale ha una densità ottica che raddoppia ogni 20 minuti, cosa si può concludere?

<p>Il tempo di generazione delle cellule è di circa 20 minuti. (B)</p>
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Cosa indica una fase stazionaria prolungata nella curva di crescita batterica di un sistema chiuso?

<p>Un equilibrio dinamico tra crescita e morte cellulare. (D)</p>
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Qual è l'impatto di un'improvvisa aggiunta di glucosio a una coltura batterica che sta metabolizzando lattosio?

<p>Si osserverà una curva diauxica, con una prima fase di crescita sul glucosio seguita da una fase di crescita sul lattosio dopo un periodo di adattamento. (A)</p>
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In un chemostato, come viene mantenuta una coltura batterica in fase di crescita esponenziale continua?

<p>Diluendo continuamente la coltura con terreno fresco e rimuovendo i prodotti di scarto. (A)</p>
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Cosa succede in un chemostato se la concentrazione di un nutriente limitante viene aumentata significativamente?

<p>La densità cellulare aumenta fino a raggiungere un nuovo equilibrio, ma il tasso di crescita rimane costante. (B)</p>
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Qual è lo scopo di un terreno di coltura arricchito?

<p>Favorire la crescita di specifici microrganismi aggiungendo nutrienti speciali. (B)</p>
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Qual è la difficoltà principale nell'utilizzare la conta al microscopio diretto per quantificare le cellule batteriche in un campione?

<p>Non distingue tra cellule vive e morte. (C)</p>
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La misurazione della torbidità di una coltura batterica serve a:

<p>Stimare la concentrazione cellulare tramite la luce diffusa. (D)</p>
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Perché è essenziale evitare espressioni del tipo '1 ml in 10 ml' quando si eseguono diluizioni seriali in microbiologia?

<p>Perché non indica chiaramente il fattore di diluizione, essenziale per il calcolo delle UFC. (D)</p>
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Quale metodo di conta microbica stima il numero di cellule vitali capaci di proliferare in condizioni specifiche?

<p>Il metodo del Most Probable Number (MPN). (D)</p>
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Cosa significa 'isolamento' in microbiologia colturale?

<p>Separare fisicamente diverse specie batteriche in modo da ottenere una coltura pura. (C)</p>
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Qual è la funzione principale dell'ansa di trapianto in microbiologia?

<p>Trasferire microrganismi da una coltura all'altra. (B)</p>
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Qual è il principio alla base della tecnica di spatolamento (spread plate) per l'ottenimento di colonie isolate?

<p>Distribuzione uniforme di un piccolo volume di campione sulla superficie di un terreno agarizzato. (A)</p>
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Quale dei seguenti è un esempio di terreno differenziale utilizzato per l'identificazione di patogeni intestinali?

<p>Agar MacConkey (B)</p>
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In un terreno agar sangue, la presenza di un alone chiaro attorno alle colonie indica quale tipo di attività?

<p>Beta-emolisi (D)</p>
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Qual è il ruolo del selenito di sodio nel terreno di arricchimento al selenio?

<p>Inibire la crescita di <em>Escherichia coli</em>. (B)</p>
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Quale caratteristica distintiva permette di identificare colonie di stafilococchi coagulasi-positivi su un terreno differenziale contenente mannitolo?

<p>Formazione di colonie gialle con terreno circostante dello stesso colore. (A)</p>
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In un terreno selettivo come il VRGB (Violet Red Bile Glucose Agar), quale componente inibisce la crescita dei batteri Gram-positivi?

<p>Sali biliari e cristal violetto. (C)</p>
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Cosa indica la presenza di un alone scuro attorno alle colonie su un terreno VRGB (Violet Red Bile Glucose Agar)?

<p>Fermentazione del glucosio con produzione di acidi. (D)</p>
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Qual è la funzione del cetrimmide nell'agar cetrimmide utilizzato per l'isolamento di Pseudomonas aeruginosa?

<p>Inibire la crescita di numerosi batteri Gram-positivi e alcuni Gram-negativi. (D)</p>
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Quale dei seguenti elementi è un componente essenziale della vitamina B12 che funge da cofattore enzimatico in alcuni batteri?

<p>Cobalto (C)</p>
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In un terreno differenziale contenente lattosio e un indicatore di pH, cosa indica una colonia rosa o rossa?

<p>Fermentazione del lattosio con produzione di acidi (A)</p>
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Qual è la formulazione da utilizzare per effettuare una diluizione 1:10?

<p>1 ml di campione in 9 ml di diluente (D)</p>
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Qual è uno svantaggio del metodo MPN?

<p>È laborioso (C)</p>
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Quale parametro influenza i risultati della misura di torbidità effettuata mediante spettrofotometro?

<p>La lunghezza d'onda utilizzata. (B)</p>
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Qual è la formula per il calcolo celle cfu/ml a partire dai dati derivanti da una replica su piastra?

<p>media x Fattore di diluizione cambiato di segno (C)</p>
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Data la seguente tabella MPN, qual è il numero caratteristico? Es. 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 3/3 2/3 1/3

<p>321 (D)</p>
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Tra i vantaggi del MPN vi è:

<p>È di facile utilizzo. (A)</p>
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Flashcards

Scissione binaria

Processo in cui la cellula microbica si divide in due nuove cellule identiche.

Elementi costitutivi

Nutrienti essenziali per la crescita microbica: H, C, O, N, P, S.

Carbonio (C)

Macronutriente più abbondante, costituisce lo scheletro delle molecole organiche.

Autotrofi

Organismi che usano CO2 come fonte di carbonio.

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Eterotrofi

Organismi che usano composti organici come fonte di carbonio.

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Micronutrienti

Richiesti in quantità minime per funzione cellulare.

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Porine

Strutture trimeriche che formano pori sulla membrana esterna.

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Crescita geometrica

Il numero di cellule raddoppia ad ogni generazione.

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Tempo di generazione

Unità di misura della divisione cellulare batterica.

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Fase Lag

Non si verifica aumento numerico; la cellula si adatta

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Fase Log (esponenziale)

Aumento massimo di cellule, consumo di nutrienti

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Fase stazione aria

Equilibrio tra crescita e morte cellulare

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Fase di morte

Riduzione di cellule

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Terreni di coltura

Terreni con nutrienti per crescita microbica.

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Terreni di coltura solidi

colonie isolati visibile ad occhio nudo

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Terreni minimi

Terreni con il minimo indispensabile, specie specifica

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Terreni complessi

estratti di cellule vegetali, usati per più gruppi

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Terreni arricchiti

addizionati con sangue o siero per certi gruppi

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Terreni selettivi

consentono la crescita esclusiva di certi gruppi

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Terreni differenziali

distinguere per caratteristiche metaboliche

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Trapianto

usato per ottenere buone crescite batteriche

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Isolamento

usato per ottenere colonie singole pure

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Conteggio su piastra

Ognni ceullula dare origine a una colonia

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Conteggio al microscopio

Volume noto del campione in camera di conta

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MPN (Most Probable Number)

metodo di stima dei vitali

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misura della torbidità

le cellule diffondono la luce, in modo proporzionale densità.

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Study Notes

Ecco i punti chiave sulla nutrizione e la crescita microbica:

  • La crescita microbica avviene tramite un processo chiamato scissione binaria.
  • Questo processo inizia con la replicazione del DNA, seguita dall'allungamento della cellula.
  • Si forma quindi un setto di divisione cellulare, che si completa fino alla separazione delle due cellule figlie.

Nutrizione e Composizione Cellulare

  • La disponibilità di nutrienti è essenziale per la crescita batterica.
  • L'acqua costituisce l'80-90% del peso totale della cellula batterica.
  • Carbonio (C), idrogeno (H), ossigeno (O), azoto (N), fosforo (P) e zolfo (S) costituiscono il 95% del peso secco.

Macronutrienti Principali (99.5% del peso secco)

  • Carbonio (C): Componente principale del materiale cellulare; i microrganismi sono autotrofi (usano C inorganico) o eterotrofi (usano C organico).
  • Ossigeno (O) e Idrogeno (H): Molto abbondanti; l'ossigeno è accettore di elettroni nella respirazione aerobia.
  • Azoto (N): Presente nelle proteine, acidi nucleici e polisaccaridi complessi; deve essere ridotto ad ammonio per essere incorporato.
  • Fosforo (P): Presente in nucleotidi, acidi nucleici e fosfolipidi; assimilato come fosfato.
  • Zolfo (S): Presente in cisteina e metionina; ridotto da solfato a solfuro.
  • Altri macronutrienti includono potassio (K), calcio (Ca), magnesio (Mg) e sodio (Na).

Micronutrienti

  • Costituiscono lo 0.5% del peso rimanente.
  • Essenziali in piccole quantità e non sempre aggiunti ai terreni di coltura standard.
  • Comprendono boro (B), cobalto (Co), cromo (Cr), manganese (Mn), molibdeno (Mo), nichel (Ni), rame (Cu), selenio (Se), tungsteno (W), vanadio (V) e zinco (Zn).

Analisi Molecolare

  • I macro e micronutrienti sono usati per sintetizzare macromolecole.
  • Le macromolecole totali costituiscono il 96% della cellula, e sono composte principalmente da proteine (55%) e lipidi.

Categorie Nutrizionali

  • In base alla fonte di energia:
    • Chemiotrofi (energia da ossidoriduzioni)
    • Fototrofi (energia luminosa)
  • In base alla fonte di carbonio:
    • Autotrofi (C inorganico)
    • Eterotrofi (C organico)
  • Le combinazioni danno origine a fotoautotrofi, fotoeterotrofi, chemioautotrofi e chemioeterotrofi.

Fattori di Crescita

  • Composti organici essenziali che la cellula non riesce a sintetizzare (es. aminoacidi, vitamine).
  • Prototrofi non richiedono fattori di crescita.
  • Auxotrofi richiedono fattori di crescita.

Assimilazione Dei Nutrienti

  • I nutrienti devono essere internalizzati attraverso la membrana esterna, peptidoglicano e membrana citoplasmatica.
  • Il trasporto avviene secondo gradiente o contro gradiente (con consumo di energia).

Modalità di Trasporto

  • Porine: Proteine trimeriche che formano pori nella membrana esterna, specifiche o aspecifiche.
  • Trasporto passivo:
    • Diffusione semplice
    • Diffusione facilitata (attraverso proteine canale o trasportatori)
  • Trasporto attivo:
    • Primario (accoppiato all'idrolisi di ATP)
    • Secondario (utilizza gradienti elettrochimici)
    • Traslocazione di gruppo (modifica chimica del nutriente durante il trasporto).

Trasporto Primario (Trasportatori ABC)

  • Utilizza l'energia derivante dal metabolismo primario (idrolisi ATP).
  • I trasportatori ABC sono costituiti da una proteina che idrolizza l'ATP, una proteina integrale che funge da canale e una proteina periplasmica con affinità per il substrato.

Trasporto Secondario

  • Utilizza il gradiente elettrochimico di ioni (H+, Na+).
  • Può avvenire per simporto (co-trasporto) o antiporto (trasporto in direzione opposta).

Traslocazione di Gruppo

  • Il nutriente viene modificato chimicamente durante il trasporto.
  • Ad esempio, il sistema fosfotransferasi (PTS) nel trasporto del glucosio.

Crescita Batterica

  • La crescita microbica avviene per scissione binaria, con progressione geometrica in base 2.
  • Il tempo di generazione è il tempo necessario per raddoppiare la popolazione cellulare.
  • La crescita può essere lineare o logaritmica.

Curve di Crescita Batterica

  • Fase di latenza (lag): Adattamento delle cellule all'ambiente, senza aumento numerico.
  • Fase esponenziale (log): Crescita alla massima velocità, con divisione cellulare a intervalli regolari.
  • Fase stazionaria: Equilibrio tra crescita e morte cellulare.
  • Fase di morte: Riduzione del numero di cellule.

Curve Diauxiche

  • In sistemi chiusi con due fonti di carbonio, si osservano due fasi esponenziali separate da una fase di stasi.

Colture in Continuo

  • Mantengono una coltura in fase esponenziale per un periodo prolungato grazie all'aggiunta continua di terreno fresco.
  • È necessario un chemostato per mantenere costante la crescita cellulare.

Controllo del Chemostato

  • La massima resa cellulare coincide con la velocità di afflusso dei nutrienti; oltre questo punto, la velocità di diluizione supera la velocità di crescita, causando il dilavamento delle cellule.

Terreni di Coltura

  • Forniscono i nutrienti necessari per la crescita microbica.
  • Possono essere liquidi (brodi) o solidi (agarizzati).
  • I terreni solidi permettono la formazione di colonie, utili per la caratterizzazione e purificazione.

Tipi di Terreni di Coltura

  • Terreni minimi: Contengono il minimo indispensabile per la crescita.
  • Terreni complessi: Contengono estratti di cellule vegetali o animali.
  • Terreni arricchiti: Addizionati con sangue, siero o altri nutrienti.
  • Terreni selettivi: Consentono la crescita di soli alcuni gruppi microbici.
  • Terreni differenziali: Distinguono i gruppi microbici in base a caratteristiche metaboliche.
  • Il trapianto e l'isolamento sono usati per ottenere buone crescite batteriche e colonie singole con forma e purezza verificate.

Metodi di Conta Cellulare

  • Metodi indiretti (coltura-dipendenti):
    • Conteggio su piastra (CFU/ml o UFC)
    • MPN (Most Probable Number)
    • Uso di membrane filtranti
  • Metodi diretti (coltura-indipendenti):
    • Conteggio al microscopio (vivi+morti)
    • Conteggio su vetrino
    • Uso di counter per cellule (citofluorimetria)
    • Misurazione della torbidità
    • Valutazioni chimiche (quantità di Nâ‚‚, proteine, P, ATP)
    • Valutazione del peso secco
    • Valutazione del volume della massa cellulare

Metodo MPN (Most Probable Number)

  • Stima il numero di microrganismi vitali capaci di proliferare.
  • Diluizioni seriali del campione vengono inoculate in provette con terreni selettivi. -Si effettua il calcolo basandosi sul Numero Caratteristico.

Misura della Torbidità

  • Le colture batteriche torbide riflettono l'intensità dell' assorbanza con spettrofotometro a 540-660 nm di lunghezza d'onda.

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