Normas de Bioseguridad y Uso del Microscopio

Introducción a las Normas de Bioseguridad y el Uso del Microscopio

• La bioseguridad se enfoca en medidas de protección para limitar los riesgos asociados al manejo de microorganismos y material biológico.
• En laboratorios, la actividad inadecuada puede ser un factor de riesgo para infecciones, causadas por operaciones cotidianas en condiciones inapropiadas.
• Las actividades de bioseguridad y bioprotección son esenciales para proteger al personal de infecciones adquiridas en el laboratorio.
• La ausencia de EPP (Equipo de Protección Personal), su uso incorrecto, o la falta de formación del personal pueden llevar a exposiciones a agentes biológicos.
• El riesgo en bioseguridad es la combinación de la probabilidad de que un peligro cause daños y la gravedad de esos daños.
• La consecuencia de una exposición puede incluir infecciones, estado de portador asintomático, contaminación ambiental o propagación de enfermedades.
• Los microorganismos infecciosos se clasifican en grupos de riesgo del 1 al 4 según la OMS.

Niveles de Bioseguridad (BSL)

• Los laboratorios se clasifican en 4 niveles de bioseguridad (BSL) según la infectividad del patógeno, la severidad de la enfermedad, el grado de transmisibilidad, el origen del agente y el tipo de trabajo.
• Nivel de bioseguridad 1 (BSL-1): Laboratorio básico para prácticas educativas con microorganismos que no causan enfermedad en humanos adultos sanos.
• Nivel de bioseguridad 2 (BSL-2): Adecuado para laboratorios de análisis, diagnóstico o patología clínica que manejan microorganismos de riesgo moderado presentes en la comunidad.
• Nivel de bioseguridad 3 (BSL-3): Laboratorio de contención para análisis/diagnóstico clínico e investigación con agentes que pueden transmitirse por aerosol y causar infecciones letales.
• Nivel de bioseguridad 4 (BSL-4): Laboratorio de contención máxima para agentes exóticos peligrosos que causan enfermedades letales y se transmiten por aerosol, sin vacuna ni terapia conocida.
• Los niveles de bioseguridad se basan en diseño, construcción, contención, equipo, prácticas y procedimientos para trabajar con grupos de riesgo.

Objetivos de la práctica

• Comprender las normas de bioseguridad en laboratorios de Microbiología.
• Reconocer equipo, material y disposición de depósitos para desechar material en el laboratorio.
• Ejecutar la desinfección correcta de la mesa de trabajo y uso del mechero.
• Comprender el funcionamiento básico del microscopio óptico.
• Reconocer las diferentes partes del microscopio y su uso adecuado.

Materiales y Equipo

• Cada grupo necesita un microscopio, frotis coloreado de Bacillus subtilis o Escherichia coli, portaobjetos y papel limpia lentes.
• Cada estudiante debe traer guantes de látex, lápiz graso, papel toalla, bolsa plástica para la gabacha y cerillos.

Desarrollo de la Práctica

• El instructor describe la organización del área de trabajo, ubicación del equipo y salidas de emergencia.
• El laboratorio se clasifica en Nivel de Bioseguridad 1 (BSL-1) según la OMS, para enseñanza, con cepas definidas y no patógenas.
• Se exige guardar normas de bioseguridad para protección personal y de los compañeros.

Normas de Bioseguridad

• Evitar el contacto con material contaminado durante el trabajo.
• Lavar con agua tibia si se contaminan los ojos, y con peróxido de hidrógeno al 1% si se contamina la boca.
• Solicitar asistencia para aplicar antiséptico si se contamina la piel o ropa.
• Mantener las uñas cortas y sin barniz, y evitar el uso de anillos y pulseras.
• Manipular con cuidado las bacterias de un frotis fijado sin colorear porque pueden no estar muertas.

Uso del Mechero

• Verificar que ambas válvulas estén cerradas y la manguera en buenas condiciones.
• Colocarlo a 25 cm del borde de la mesa para permitir movilidad segura.
• Encenderlo con chispero o fósforo al lado del tubo, nunca sobre la boquilla.
• Apagar el mechero al finalizar el trabajo.

Exposición Ocupacional

• Colocar objetos personales en la zona designada, lejos del área de trabajo.
• No usar la gabacha de laboratorio como mantel o colchoneta.
• Verificar la ubicación de salidas de emergencia y extintor de incendios.

Prácticas Laborales

• El lavado de manos es obligatorio al finalizar el trabajo y después de quitarse el EPP (equipo de protección personal), así como después del contacto con sangre o material infeccioso.
• No reutilizar jeringas.

Seguridad Alimentaria y Personal

• No ingerir alimentos ni bebidas, no fumar, no aplicar cosméticos, no hablar por celular y no manipular lentes de contacto.
• No guardar comida ni bebidas donde haya material infeccioso.
• No pipetear con la boca

Equipo de Protección Personal

• Vestir adecuadamente en el laboratorio (sin minifaldas o pantalones cortos) y usar calzado cerrado.
• Usar gabacha limpia de manga larga, guantes de látex, mascarilla y lentes protectores.
• Lavar la gabacha en bolsa plástica individualmente después de cada práctica.
• No lavar ni reutilizar los guantes de látex.

Limpieza y Desinfección

• Desinfectar las mesas de trabajo antes y después de cada práctica.
• Aplicar desinfectante (cloruro de benzalconio al 0.1% o fenol al 5%) al inicio y al final de la práctica.
• Lavarse bien las manos con agua y jabón después de usar desinfectantes.

Manejo de Desechos

• Colocar material contaminado en depósitos especiales identificados.
• Descartar agua de bandejas de coloración en el resumidero.
• Descartar material de desecho inmediatamente en el lugar adecuado.
• Comunicar derrames o roturas de material que contenga microorganismos al instructor y seguir sus indicaciones.

Información sobre el Microscopio

Tipos de Microscopios

• Microscopios simples: Amplifican imágenes (ej., lupas).
• Microscopios compuestos: Amplifican, clarifican e identifican estructuras con lentes ópticos, iluminación y ajustes mecánicos.
• El microscopio óptico consta de lentes y utiliza luz visible para iluminación.
• La magnificación total se calcula multiplicando el aumento del ocular por el del objetivo

Partes del Microscopio

Sistema Mecánico:

• Pie: Base que sostiene el aparato.
• Brazo: Para trasladar el microscopio.
• Tornillo macrométrico: Para enfoque rápido.
• Tornillo micrométrico: Para ajuste fino de la imagen.
• Revólver: Sostiene y cambia los objetivos.
• Platina: Sostiene la muestra y permite el paso de luz.
• Carro: Desplaza la muestra.
• Cremallera del condensador: Sube y baja el condensador.

Sistema Óptico:

• Oculares: Lentes superiores para observar la imagen.
• Objetivos: Lentes en el revólver (panorámico 4X, seco débil 10X, seco fuerte 40X, inmersión 100X).
• Condensador: Concentra la luz en la muestra.

Sistema de Iluminación:

• Fuente de luz: Lámpara que ilumina la muestra.
• Diafragma: Amplía o disminuye la apertura para controlar la luz.
• Filtro: Atenúa la intensidad de la luz y selecciona los rayos luminosos.

Limpieza

• Limpiar los oculares y objetivos con papel especializado.

Funcionamiento del Microscopio Compuesto

• Dos tipos de lentes: el objetivo, que aumenta el tamaño de la imagen, y el ocular, que agranda la imagen proporcionada por el objetivo.
• Un haz de luz se desvía hacia el objetivo, se refracta por el condensador y se concentra en la muestra.
• Al atravesar el objetivo, se proyecta una imagen real, invertida y mayor hacia el ocular.
• Se utilizan los objetivos 100X con aceite de inmersión para obtener mayor aumento y resolución.

Técnica de Enfoque

1. Verificar la conexión de la fuente de luz.
2. Encender la lámpara y asegurar que el objetivo 4X esté en posición de trabajo.
3. Colocar y centrar el frotis en la platina.
4. Ajustar la platina con el tornillo macrométrico hasta lograr un enfoque aproximado, luego usar el micrométrico para mayor precisión.
5. Enfocar la imagen con el objetivo 10X, luego con el 40X, utilizando solo el tornillo micrométrico.
6. Colocar aceite de inmersión en el centro del campo con el objetivo 40X antes de usar el objetivo 100X.
7. Visualizar el objeto con el micrométrico y retirar la lámina portaobjetos después del estudio.
8. Limpiar las lentes del objetivo 100X con papel fino y absorbente.
9. Asegurarse de que el objetivo 4X quede en posición de trabajo.
10. Apagar la fuente de luz y desconectar el cable, enrollándolo alrededor del microscopio.

• Cuidar el microscopio asignado.