T1 - Introducción a la Histología _ Médium

Introducción a la Histología

• La histología es la ciencia que estudia los tejidos a nivel microscópico.
• Se deriva del griego "histos" que significa tejido.
• Se enfoca en la anatomía microscópica de los tejidos.

Histología

• Tejido definición: Asociación de células semejantes o con diferenciación similar, junto con sus derivados y las sustancias intercelulares.
• Tejido: Es un grupo de células del mismo tipo que comparten una función.
• Órgano: Estructura compuesta por distintos tejidos que trabajan juntos para realizar una función histológica común.
• Wolfgang Bargmann (1906-1976)

Objetivos de la Histología

• Conocer la estructura microscópica de los tejidos humanos.
• Comprender la relación entre la estructura de los tejidos y su función.
• Reconocer y distinguir los diferentes tipos de tejidos.
• Conocer y aplicar métodos de estudio de los tejidos.

Histología Celular

• Las células trabajan conjuntamente mediante contacto físico y/o moléculas de señalización.
• Hay 4 tipos básicos de tejidos: conectivo, epitelial, muscular y nervioso.

Tipos de Tejidos Animales

• Tejido Epitelial: Incluye el epitelio de revestimiento y glandular.
• Tejido Conectivo: Se clasifica en laxo, denso y especializado (adiposo, óseo, cartilaginoso, sangre, mucoso, reticular y mesénquima).
• Tejido Muscular: Comprende los tipos esquelético, cardíaco y liso.
• Tejido Nervioso

Tejido Epitelial

• Tejido compuesto por células cohesionadas sin estructuras intercelulares que las separen.
• Funciones de protección mecánica contra microorganismos y de aislamiento.
• En superficies internas, funciona en absorción, secreción y como barrera.
• Se divide en revestimiento y glandular

Tejido Conjuntivo

• Derivado del mesénquima
• Células separadas
• Abundante matriz extracelular
  • Secretada por las células del tejido
  • Polisacáridos y glucoproteínas
  • Propiedades físicas
• Funciones
  • Relleno, soporte y sostén de órganos, tejidos, vasos y nervios
  • Almacenamiento y transporte
  • Defensa
  • Protege y aísla órganos
  • Reparación tisular

Tejido muscular

• Estriado esquelético, estriado cardíaco y liso
• Filamentos contráctiles, con energía química que se convierte en energía mecánica.
• Cada tipo de tejido tiene distinta estructura y función.

Tejido Nervioso

• Constituido por neuronas (células nerviosas) y células gliales.
• Se origina del ectodermo.

Histogénesis

• Los tejidos derivan de capas embrionarias específicas:
  • Ectodermo: Epitelial (totipotencial) y Nervioso (diferenciado).
  • Mesodermo: Epitelial (totipotencial), Conectivo (totipotencial) y Muscular (diferenciado).
  • Endodermo: Epitelial (totipotencial).

Preparación de Tejidos

• Fijación: Proceso para conservar las características del tejido similar a su estado in vivo, aumentar su dureza y destruir gérmenes. También interrumpe procesos celulares post mortem.
• Deshidratación: Serie gradual de soluciones acuosas con concentraciones cada vez mayores de agente deshidratante. Ejemplo: alcohol etílico o acetona al 50% -> 60% -> 70% -> 100%.
• Inclusión: El tejido se incluye en una sustancia de consistencia firme como gelatina o parafina. También se utiliza resinas polimerizadas para microscopía electrónica.

Preparación de Tejidos Parte II

• Corte: Se realiza con un micrótomo o criostato para obtener cortes finos.
• Tinción: Colocación del corte sobre portaobjetos, se elimina la parafina mediante rehidratación y se aplican colorantes para diferenciar componentes ácidos y básicos, detectar fibras o sales metálicas.

Técnicas de Microscopía

• Microscopía óptica convencional para cortes de 5-10 µm de grosor.

Procesamiento de Muestras

• Puede ser un procesamiento normal o una biopsia intraoperatoria.

Tinciones

• Hematoxilina-Eosina:
  • Hematoxilina es un colorante básico que tiñe de azul-violeta la cromatina y ribosomas.
  • Eosina es un colorante ácido que tiñe de rosa las mitocondrias, proteínas y colágeno.
• Wright y Giemsa:
  • Tinción diferencial para células sanguíneas.
  • Eosina tiñe eritrocitos y gránulos eosinófilos de rosa.
  • El azul de metileno tiñe el citoplasma de monocitos y linfocitos.
• Ácido Peryódico de Schiff (PAS):
  • Tinción diferencial que tiñe polisacáridos y oligosacáridos (glucógeno, mucus, membrana basal, fibras reticulares) de magenta o púrpura.
• Tricrómico de Masson:
  • Tinción diferencial de colágeno.
  • El azúl oscuro se usa para los núcleos
  • El rojo se usa para la queratina y el citoplasma.
  • El azúl claro se usa para la mucina y el colágeno
• Tinción Argéntica:
  • Tinción diferencial de fibras reticulares, dendritas, axones y prolongaciones gliales.
• Tinciones liposolubles:
  • Permiten ver lípidos con Sudan, donde el colorante se disuelve en las gotas de lípidos y se evidencia en color rojo.

Histoquímica

• Identificación, localización y cuantificación de sustancias específicas, grupos funcionales o reacciones enzimáticas en células y tejidos mediante métodos físicos o químicos.

Histoquímica Enzimática

• Se evidencian enzimas y sustratos En su lugar natural
  • Fosfatasas en lisosomas
  • Peroxidasa en células sanguíneas
  • Succinato-deshidrogenasa en mitocondrias
• Muestra + sustrato,
• Marcador que reaccione con un producto de la reacción, Precipitado coloreado o electrodenso

Inmunohistoquímica

• Directa ó indirecta
• Permite detectar el Ag y requiere anticuerpos marcados.
• Utiliza colorantes fluorescentes (inmunofluorescencia) o enzimas (técnicas inmunoenzimáticas).
• Detecta moléculas específicas con gran precisión.

Autorradiografía

• Incorporación de isótopos radiactivos a macromoléculas.
  • Tritio (H3)
• Fisiología Celular.
  • Localización e investigación de secuencias temporales de fenómenos celulares.
    • Inyección
    • Muestra de tejido a intervalos de tiempo
    • Procesamiento
    • Emulsión fotográfica
    • Oscuridad
    • Revelado
• Gránulos de plata ennegrecidos en las zonas donde se incorporó el isótopo radiactivo

Interpretación

• Fijamos algo vivo y cambiante
• ≠ tinciones para ≠ componentes
• Parte mínima de un todo
• Depende del corte
• Imagen 2D de algo 3D

Artefactos

• Alteraciones producidas a causa del procesamiento
  • Retracción por fijación
    • *Espacios artificiales
  • Pérdida de moléculas que no se conservan
  • Colorante viejo
  • Pliegues
  • Mellas en la cuchilla