Genoma Umano: Sequenziamento e Metodo Sanger

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30 Questions

In quali frammenti possono essere divisi i genomi durante la preparazione della libreria?

Da regioni diverse o dall'intero genoma

Qual è lo scopo dell'amplificazione clonale?

Preparare la libreria per la sequenziazione

Quale tecnica viene utilizzata dalle prime tre piattaforme per generare la libreria?

ePCR

Che cosa viene utilizzato per etichettare i frammenti durante la preparazione della libreria?

Etichette fluorescenti

Quale piattaforma utilizza il cluster per generare la libreria?

L'ultima piattaforma

Qual è il principio chimico alla base del pirosequenziamento?

Pirofosfato

Quale è il risultato sulla quantità di sequenze generate quando si hanno due frammenti invece di uno?

Si dimezza la quantità di sequenze

Perché il blocco in posizione 3' viene rimosso nel metodo di sequenziamento?

Perché la polimerasi non continui ad inserire nucleotidi

Che cosa vengono definite le biglie con solo un tipo di frammento sulla superficie?

Monoclonali

Cosa si verifica dopo che il nucleotide è stato incorporato?

Il segnale di fluorescenza viene registrato dallo strumento

Quale è il compito della polimerasi all'interno del pozzetto?

Sintetizzare il filamento complementare

Perché bisogna lavare tutto via in seguito all'incorporazione del nucleotide?

Perché ci sono i segnali dei nucleotidi marcati che non sono stati incorporati

Perché la resa della reazione viene penalizzata?

Perché i metodi computazionali a valle aiutano a discriminare le diverse sequenze

Quale è il ruolo del blocco in posizione 3'?

Bloccare la polimerasi ad inserire nucleotidi

Che cosa contiene la piastra picotiter?

Milioni di pozzetti

Cosa avviene dopo la recezione del segnale di fluorescenza?

Il blocco viene eliminato e il fluorocromo viene allontanato

Quale è il risultato della reazione all'interno del pozzetto?

Una reazione luminescente

Cosa viene sequenziato dopo l'ibridazione e l'amplificazione dei frammenti?

Tutti i frammenti, nuovi e vecchi

Quanti frammenti di DNA erano presenti nel metodo Shotgun di Celera?

Milioni

Qual è il nome del metodo di sequenziamento utilizzato nel sequenziatore rappresentato in alto a sx?

Metodo Sanger

Cosa si trova all'interno di ogni capillare nel sequenziatore?

Una matrice con fluorocromi

Quale processo avviene all'interno di ogni capillare?

Micro-elettroforesi

A cosa serve la micro-elettroforesi?

Separare i frammenti di DNA

In quali occasioni viene utilizzata anche la micro-elettroforesi?

Quando si vuole analizzare e separare delle miscele o dei frammenti di DNA

Perché vengono scartate le micelle o le biglie che non servono?

Perché contengono solo il DNA o solo la biglia

Qual è il problema della fase di arricchimento?

Non riesce a discriminare le biglie monoclonali da quelle policlonali

Cosa si utilizza per legare la biotina alle biglie?

Streptavidina

Quale è il requisito per considerare una corsa efficiente?

La percentuale di policlonali deve essere inferiore al 20-30%

Cosa viene aggiunto all'estremità del frammento di DNA sulla biglia?

Biotina

Qual è lo scopo della reazione biotina-streptavidina?

Scartare le biglie che non servono

Scopri il processo di sequenziamento del genoma umano e il metodo Sanger utilizzato per la sua comprensione. Questo quiz ti porterà alla scoperta della storia del sequenziamento del genoma umano.

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