Fijación de tejidos: métodos y fijadores

Fixation

• Purpose: Preserve tissue morphology and prevent autolysis/degradation
• Methods:
  • Chemical fixation: immersion in fixatives (e.g., formaldehyde, glutaraldehyde) to cross-link proteins and stabilize tissue
  • Physical fixation: freezing or heat to stop enzymatic activity
• Fixatives:
  • Formaldehyde: most common, fixes tissue quickly, but can cause protein denaturation
  • Glutaraldehyde: slower fixation, but better preserves ultrastructure
  • Ethanol and acetone: used for molecular biology applications
• Factors to consider:
  • Fixation time and temperature
  • Tissue size and type
  • Type of fixative used

Sectioning

• Purpose: Cut fixed and embedded tissue into thin sections for microscopic examination
• Methods:
  • Microtomy: using a microtome to cut sections (typically 5-10 μm thick)
  • Cryosectioning: cutting frozen tissue sections (typically 5-20 μm thick)
• Types of microtomes:
  • Rotary microtome: most common, uses a rotating blade
  • Sliding microtome: uses a reciprocating blade
  • Cryostat microtome: designed for frozen tissue
• Factors to consider:
  • Section thickness and quality
  • Tissue orientation and embedding
  • Microtome settings and maintenance

Decalcification

• Purpose: Remove calcium salts from bone or calcified tissue to allow sectioning
• Methods:
  • Chemical decalcification: immersion in acids (e.g., hydrochloric acid, nitric acid) or chelating agents (e.g., EDTA)
  • Enzymatic decalcification: using enzymes (e.g., formic acid) to break down calcium salts
• Factors to consider:
  • Decalcification time and concentration
  • Tissue type and size
  • Risk of tissue damage or loss

Staining

• Purpose: Enhance contrast and visibility of tissue structures
• Methods:
  • Chemical staining: using dyes or pigments to bind to specific tissue components
  • Immunohistochemical staining: using antibodies to detect specific proteins or antigens
• Types of stains:
  • Hematoxylin and eosin (H&E): most common, stains nuclei and cytoplasm
  • Special stains: e.g., periodic acid-Schiff (PAS) for carbohydrates, Giemsa for bacteria
  • Fluorescent stains: e.g., DAPI for nuclei, Alexa Fluor for proteins
• Factors to consider:
  • Stain type and concentration
  • Tissue type and fixation method
  • Staining protocol and timing

Embedding

• Purpose: Support and stabilize tissue for sectioning
• Methods:
  • Paraffin wax embedding: most common, uses melted wax to infiltrate and encase tissue
  • Resin embedding: uses synthetic resins (e.g., epoxy, acrylic) for high-resolution electron microscopy
  • Frozen section embedding: uses a mixture of water and cryoprotectants to support frozen tissue
• Factors to consider:
  • Embedding medium and temperature
  • Tissue size and type
  • Orientation and positioning of tissue

Fijación

• Preserva la morfología tisular y evita la autolisis/degradación
• Métodos:
  • Fijación química: inmersión en fijadores (p. ej., formaldehído, glutaraldehído) para cross-linking de proteínas y estabilizar el tejido
  • Fijación física: congelación o calor para detener la actividad enzimática
• Fijadores:
  • Formaldehído: más común, fija rápidamente el tejido, pero puede denaturar proteínas
  • Glutaraldehído: fija más lentamente, pero preserve mejor la ultraestructura
  • Etanol y acetona: utilizados para aplicaciones de biología molecular
• Factores a considerar:
  • Tiempo y temperatura de fijación
  • Tamaño y tipo de tejido
  • Tipo de fijador utilizado

Seccionado

• Propósito: Cortar el tejido fijado y embebido en secciones delgadas para examen microscópico
• Métodos:
  • Microtomía: utilizando un microtomo para cortar secciones (típicamente 5-10 μm de grosor)
  • Crioseccionado: cortar secciones de tejido congelado (típicamente 5-20 μm de grosor)
• Tipos de microtomos:
  • Microtomo rotatorio: más común, utiliza una cuchilla rotatoria
  • Microtomo deslizante: utiliza una cuchilla reciproca
  • Microtomo crióstato: diseñado para tejido congelado
• Factores a considerar:
  • Grosor y calidad de la sección
  • Orientación y embebido del tejido
  • Ajustes y mantenimiento del microtomo

Descalcificación

• Propósito: Remover sales de calcio del hueso o tejido calcificado para permitir el seccionado
• Métodos:
  • Descalcificación química: inmersión en ácidos (p. ej., ácido clorhídrico, ácido nítrico) o agentes quelantes (p. ej., EDTA)
  • Descalcificación enzimática: utilizando enzimas (p. ej., ácido fórmico) para descomponer sales de calcio
• Factores a considerar:
  • Tiempo y concentración de descalcificación
  • Tipo y tamaño de tejido
  • Riesgo de daño o pérdida de tejido

Tinción

• Propósito: Realzar el contraste y visibilidad de las estructuras tisulares
• Métodos:
  • Tinción química: utilizando tintes o pigmentos para unirse a componentes tisulares específicos
  • Tinción inmunohistoquímica: utilizando anticuerpos para detectar proteínas o antígenos específicos
• Tipos de tintes:
  • Hematoxilina y eosina (H&E): más común, tine los núcleos y citoplasma
  • Tintes especiales: p. ej., ácido periódico-Schiff (PAS) para carbohidratos, Giemsa para bacterias
  • Tintes fluorescentes: p. ej., DAPI para núcleos, Alexa Fluor para proteínas
• Factores a considerar:
  • Tipo y concentración de tinte
  • Tipo de tejido y método de fijación
  • Protocolo y tiempo de tinción

Embebido

• Propósito: Apoyar y estabilizar el tejido para el seccionado
• Métodos:
  • Embebido en parafina: más común, utiliza cera derretida para infiltrar y encasar el tejido
  • Embebido en resina: utiliza resinas sintéticas (p. ej., epoxi, acrílico) para microscopía electrónica de alta resolución
  • Embebido en secciones congeladas: utiliza una mezcla de agua y crioprotectantes para apoyar el tejido congelado
• Factores a considerar:
  • Medio de embebido y temperatura
  • Tamaño y tipo de tejido
  • Orientación y posición del tejido

Disfunción Eréctil

• La disfunción eréctil es la incapacidad de lograr o mantener una erección suficiente para la actividad sexual.
• Causas:
  • Físicas: diabetes, presión arterial alta, obesidad, enfermedad cardiovascular
  • Psicológicas: estrés, ansiedad, depresión
  • Medicamentos: ciertos antidepresivos, medicamentos para la presión arterial
  • Estilos de vida: fumar, consumo excesivo de alcohol
• Síntomas:
  • Dificultad para lograr una erección
  • Dificultad para mantener una erección
  • Reducción del deseo sexual
• Opciones de tratamiento:
  • Medicamentos: sildenafil (Viagra), tadalafil (Cialis), vardenafil (Levitra)
  • Cambios en el estilo de vida: ejercicio, dieta, gestión del estrés
  • Consejería: terapia sexual, terapia de pareja

Kama Sutra

• Texto antiguo indio sobre la sexualidad y las relaciones humanas
• Escrito por Vatsyayana Mallanaga alrededor del 400 CE
• Se centra en el placer, la intimidad y la conexión emocional
• DescribeVarious posiciones sexuales, incluyendo:
  • Posiciones de pie
  • Posiciones sentadas
  • Posiciones acostadas
  • Posiciones arrodilladas
  • Posiciones acrobáticas
• Enfatiza el placer mutuo, el respeto y la comunicación en las relaciones sexuales

Salud Sexual

• La salud sexual es un estado de bienestar físico, emocional, mental y social en relación con la sexualidad
• Importancia:
  • Mantener relaciones saludables
  • Prevenir las infecciones de transmisión sexual (ITS)
  • Prevenir el embarazo no deseado
  • Mejorar el bienestar general
• Factores que afectan la salud sexual:
  • Biológicos: hormonas, anatomía
  • Psicológicos: autoestima, imagen corporal
  • Socioculturales: normas culturales, expectativas sociales
  • Ambientales: acceso a la atención médica, educación

Terapia Sexual

• La terapia sexual es un tipo de psicoterapia que aborda los problemas y inquietudes sexuales
• Objetivos:
  • Mejorar la función y el placer sexual
  • Mejorar la intimidad y la comunicación
  • Abordar las disfunciones sexuales
  • Incrementar el conocimiento y la conciencia sexual
• Técnicas:
  • Terapia cognitivo-conductual (TCC)
  • Ejercicios de enfoque sensorial
  • Capacitación en habilidades de comunicación
  • Intervenciones basadas en la mindfulness

Intimidad

• La intimidad es una conexión personal cercana con alguien, caracterizada por la proximidad emocional y el contacto físico
• Importancia:
  • Construye la confianza y la conexión emocional
  • Mejora la satisfacción sexual
  • Fomenta la comunicación y la empatía
  • Apoya la satisfacción general en la relación
• Tipos de intimidad:
  • Intimidad emocional: compartir sentimientos, pensamientos y deseos
  • Intimidad física: tocarse, besarse, actividad sexual
  • Intimidad intelectual: compartir ideas, intereses y valores
  • Intimidad espiritual: compartir creencias, valores y significado