Cromosoma artificial de levadura (YAC)
10 Questions
1 Views

Choose a study mode

Play Quiz
Study Flashcards
Spaced Repetition
Chat to lesson

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

¿Qué se necesita para que una célula auxótrofa pueda crecer en un medio sin uracilo y triptófano?

  • Agregar un plásmido con origen de replicación de levaduras
  • Introducir un plásmido con marcadores de E.Coli
  • Incorporar un vector con genes para uracilo y triptófano (correct)
  • Eliminar el plásmido con la secuencia centromérica

    • ¿Qué efecto tiene el gen SUP4 en las colonias de levadura mutantes en el gen ade-2?

  • Induce la muerte celular en las colonias mutantes
  • Aumenta la expresión del gen ade-2, dando lugar a colonias rojas
  • Restaura el efecto de la mutación en ade-2, haciendo que las colonias sean blancas (correct)
  • No tiene ningún efecto en las colonias mutantes

    • ¿Qué sucede al cortar el DNA de interés con las enzimas SnaB1 y BamH1?

  • Se generan 3 fragmentos lineales, interesando los 2 más grandes (correct)
  • No se obtiene ningún fragmento lineal utilizable
  • Se generan múltiples fragmentos de tamaños variados
  • Se obtiene un solo fragmento lineal del tamaño deseado

    • ¿Qué contienen los cromosomas lineales de levadura?

    <p>Centrómero y telómeros</p> Signup and view all the answers

    ¿Por qué es importante el sitio de clonación SnaB1 al clonar el DNA de interés?

    <p>Está en medio del gen SUP4 pero no impide la formación de la proteína a menos que se haya introducido el inserto</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué enzimas se utilizan para cortar el gen de manera que esté en fase con una etiqueta que le da estabilidad?

    <p>BamH1 y EcoR1</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es la función del factor Xa en el sistema de purificación de proteínas de fusión a GST?

    <p>Romper la secuencia GST de la proteína fusionada</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué elemento del sistema de purificación de proteínas de fusión a GST contiene el sitio de clonación múltiple (BSE)?

    <p>Aguas debajo de la secuencia de GST</p> Signup and view all the answers

    ¿Qué papel juega la columna con glutatión pegado en el proceso de purificación?

    <p>Se une específicamente a GST</p> Signup and view all the answers

    ¿Cuál es el papel del gen que codifica para la glutatión transferasa (GST) en el sistema de purificación?

    <p>Servir como etiqueta que da estabilidad a la proteína fusionada</p> Signup and view all the answers

    Study Notes

    Crecimiento de células auxótrofas

    • Una célula auxótrofa puede crecer en un medio sin uracilo y triptófano si cuenta con los genes que codifican para las enzimas necesarias para la síntesis de estos compuestos.
    • Las células auxótrofas carecen de genes que codifican para enzimas necesarias para la síntesis de ciertos nutrientes.

    Gen SUP4 y levadura mutante

    • El gen SUP4 tiene un efecto supresor sobre las colonias de levadura mutantes en el gen ade-2.
    • El gen SUP4 permite que las colonias de levadura mutantes crezcan normalmente.

    Cortar DNA con enzimas

    • Las enzimas SnaB1 y BamH1 se utilizan para cortar el DNA de interés en fragmentos específicos.
    • El corte del DNA de interés con estas enzimas permite la clonación del gen deseado.

    Cromosomas lineales de levadura

    • Los cromosomas lineales de levadura contienen el material genético de la levadura.
    • Estos cromosomas son importantes para la supervivencia y el crecimiento de la levadura.

    Sitio de clonación SnaB1

    • El sitio de clonación SnaB1 es importante al clonar el DNA de interés porque permite una clonación dirigida y eficiente.
    • Este sitio de clonación permite que el DNA de interés se una a un vector de clonación.

    Enzimas para cortar genes

    • Las enzimas que se utilizan para cortar el gen de manera que esté en fase con una etiqueta que le da estabilidad son, por ejemplo, las enzimas de restricción.
    • Estas enzimas permiten que el gen se una a una etiqueta que le da estabilidad y facilite su expresión.

    Factor Xa y purificación de proteínas

    • El factor Xa es una enzima que se utiliza en el sistema de purificación de proteínas de fusión a GST (Glutathione-S-Transferasa).
    • El factor Xa permite la separación de la proteína de fusión de la etiqueta GST.

    Sitio de clonación múltiple

    • El sitio de clonación múltiple (BSE) se encuentra en el sistema de purificación de proteínas de fusión a GST.
    • Este sitio de clonación permite que varios genes se unan a la etiqueta GST.

    Columna con glutatión pegado

    • La columna con glutatión pegado se utiliza en el proceso de purificación de proteínas de fusión a GST.
    • La columna con glutatión pegado permite que la proteína de fusión se una a la columna y se separe de otras proteínas.

    Gen GST

    • El gen que codifica para la glutatión transferasa (GST) es importante en el sistema de purificación de proteínas.
    • El gen GST permite que la proteína de fusión se una a la etiqueta GST, lo que facilita su purificación.

    Studying That Suits You

    Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

    Quiz Team

    Description

    Aprende sobre la creación de cromosomas artificiales de levadura (YAC) utilizando plásmidos con características específicas como secuencias centroméricas, teloméricas, origen de replicación de levaduras y marcadores eucarióticos.

    More Like This

    Use Quizgecko on...
    Browser
    Open
    Browser
    Browser