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Questions and Answers

What is the main goal of conventional cytogenetics?

  • To create new types of cells for research.
  • To analyze proteins within the cell nucleus.
  • To study chromosomes obtained from cell cultures in vitro. (correct)
  • To modify the genetic material of cells in vitro.

During which phase of cell division are chromosomes best visualized for individual identification?

  • Prophase
  • Metaphase (correct)
  • Anaphase
  • Telophase

Which of the following is NOT a type of sample from which chromosomes can be obtained in vivo for metaphase analysis?

  • Chorionic villi
  • Peripheral blood lymphocytes (correct)
  • Solid tumors
  • Bone marrow

What is the primary purpose of cell cultures in prenatal cytogenetic diagnostics?

<p>To detect chromosomal abnormalities. (B)</p> Signup and view all the answers

What definition best describes the term 'cell culture'?

<p>The maintenance of cells in an artificial environment to preserve their physiological, biochemical, and genetic properties. (D)</p> Signup and view all the answers

Which application is NOT typically associated with cell culture techniques?

<p>Direct tissue regeneration in vivo without cell transplantation (A)</p> Signup and view all the answers

Why is controlling the culture environment important?

<p>To allow the precise control of environmental factors influencing cell behavior. (A)</p> Signup and view all the answers

What is a key advantage of using cell cultures in research, compared to using whole animals?

<p>Cell cultures reduce costs and allow more tests with lower reagent concentrations. (C)</p> Signup and view all the answers

What is a significant drawback of cell cultures?

<p>The potential for contamination due to the complex nutrient requirements of animal cells. (C)</p> Signup and view all the answers

What is a key characteristic of continuous cell cultures concerning their chromosomal makeup?

<p>They tend to be unstable due to aneuploidy. (D)</p> Signup and view all the answers

Which of the following characteristics is NOT associated with in vitro cell culture models?

<p>The presence of the native three-dimensional tissue organization. (D)</p> Signup and view all the answers

What best describes an organ culture?

<p>The maintenance of the original tissue architecture in vitro. (C)</p> Signup and view all the answers

What happens to the cellular heterogeneity in a cell culture over time?

<p>The starting heterogeneity is lost. (B)</p> Signup and view all the answers

What is a key difference between primary and secondary cell cultures?

<p>Secondary cultures are derived from primary cultures. (B)</p> Signup and view all the answers

What does 'subculturing' refer to?

<p>The process of removing and transplanting them to a new surface. (C)</p> Signup and view all the answers

What is a key limiting factor of primary cell cultures?

<p>Limited proliferation (D)</p> Signup and view all the answers

What is an essential prerequisite for cell proliferation in monolayer cultures?

<p>Attachment to a solid support (A)</p> Signup and view all the answers

What is the primary reason for the possible loss of differentiated properties in cell cultures?

<p>Cellular dedifferentiation occurs. (C)</p> Signup and view all the answers

What characteristic defines continuous cell lines?

<p>Unlimited lifespan. (C)</p> Signup and view all the answers

What biological process is described as the point where cells gradually lose their ability to divide, eventually leading to culture death?

<p>Senescence (B)</p> Signup and view all the answers

Which factor is NOT a method to induce immortalization in cell lines?

<p>Low cell density (C)</p> Signup and view all the answers

During which phase of the cell growth curve does the number of cells increase exponentially?

<p>Exponential phase (C)</p> Signup and view all the answers

Why must cell culture laboratories maintain aseptic conditions?

<p>The growth rate of cell cultures is slower than that of common contaminants. (B)</p> Signup and view all the answers

In a cell culture medium, what is the role of balanced salt solutions?

<p>Providing a base in which to disolve components (A)</p> Signup and view all the answers

Why is maintaining the correct pH important in cell cultures?

<p>pH is a key parameter for viability. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué técnica permite identificar individualmente los cromosomas?

<p>División celular y microscopía (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes NO es una aplicación directa de la medicina regenerativa en el contexto de cultivos celulares?

<p>Producción de vacunas antivirales (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es una ventaja clave del uso de cultivos celulares en comparación con la experimentación con animales completos desde una perspectiva ética?

<p>Reducción del número de animales sacrificados (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es una limitación significativa de los cultivos de órganos?

<p>Incapacidad para la propagación del cultivo a largo plazo. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué se entiende por 'subcultivo o pase' en el contexto de cultivos celulares primarios?

<p>El trasplante de células a un nuevo soporte para promover el crecimiento. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes afirmaciones describe mejor una línea celular continua?

<p>Células que pueden proliferar indefinidamente in vitro. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué proceso describe la etapa en la que las células pierden gradualmente su capacidad de dividirse y el cultivo llega a su fin?

<p>Senescencia. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes NO es un método común para inducir la inmortalización en líneas celulares?

<p>Tratamiento con antioxidantes. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Durante qué fase de la curva de crecimiento celular el número de células permanece constante?

<p>Fase estacionaria. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es crucial evitar la contaminación por microorganismos en los cultivos celulares?

<p>Porque los contaminantes pueden crecer más rápido y consumir los nutrientes. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la función principal de las soluciones salinas equilibradas en un medio de cultivo celular?

<p>Mantener la presión osmótica y el equilibrio iónico. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es esencial monitorear y ajustar el pH en los medios de cultivo celular?

<p>Para asegurar la actividad enzimática óptima y la supervivencia celular. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué ventaja ofrecen los cultivos celulares en términos de homogeneidad de la muestra?

<p>Pueden mantener una población celular uniforme. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué desventaja clave se asocia con el crecimiento lento de células animales en cultivo?

<p>Aumenta el riesgo de contaminación. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué características distinguen a los cultivos en monocapa?

<p>Las células crecen adheridas a un soporte sólido. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué las líneas celulares continuas pueden crecer indefinidamente?

<p>Debido a la pérdida de los mecanismos de control celular. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de utilizar inhibidores del crecimiento de contaminantes en un medio de cultivo?

<p>Evitar la proliferación de bacterias, hongos y otros contaminantes. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el indicador de pH más comúnmente utilizado en los cultivos?

<p>Rojo fenol. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es importante que la osmolaridad de los medios de cultivo sea isotónica o ligeramente hipotónica?

<p>Evitar que las células se hinchen o se contraigan debido a la presión osmótica. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué ocurre si las células en cultivo se exponen a temperaturas significativamente por encima de su temperatura corporal normal?

<p>Mueren después de un corto período de tiempo. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué función tiene la cabina de seguridad biológica o de flujo laminar?

<p>Mantener un área de trabajo libre de partículas y contaminantes. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Para qué se utiliza un incubador de CO2 en un laboratorio de cultivo celular?

<p>Para proporcionar y mantener condiciones óptimas de temperatura, humedad y CO2. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de la tripsina en la disgregación celular?

<p>Romper las uniones entre las células adheridas a la placa. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el uso del azul tripán en la determinación de la viabilidad celular?

<p>Para identificar las células muertas. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes factores NO es crítico para el mantenimiento de la asepsia en un laboratorio de cultivo celular?

<p>Tener técnicos de anatomía patológica. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué tipo de muestra es preferible para el análisis genético postnatal debido a su fácil acceso?

<p>Sangre periférica. (C)</p> Signup and view all the answers

En el contexto de cultivos primarios, ¿qué significa el término 'subcultivo o pase'?

<p>El trasplante de células a un nuevo soporte para promover el crecimiento. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué ventaja ofrecen las líneas celulares continuas en comparación con los cultivos primarios?

<p>Pueden crecer indefinidamente. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué equipo es fundamental para esterilizar tanto sólidos como líquidos en un laboratorio de cultivo celular?

<p>Autoclave. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la función principal de los congeladores de -80°C en un laboratorio de cultivo celular?

<p>Almacenar aditivos del medio y sustancias sensibles a largo plazo. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito de utilizar inhibidores del crecimiento de contaminantes en un medio de cultivo celular?

<p>Prevenir el crecimiento de bacterias y hongos. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué característica define a los cultivos de órganos?

<p>Se mantiene la arquitectura tridimensional del tejido original. (A)</p> Signup and view all the answers

Durante la fase de crecimiento exponencial en un cultivo celular, ¿qué ocurre con el número de células?

<p>Aumenta exponencialmente. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué implica la senescencia en el contexto de cultivos celulares?

<p>La pérdida gradual de la capacidad de dividirse y la muerte del cultivo. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el propósito principal de la centrífuga refrigerada en el laboratorio de cultivo de tejidos?

<p>Separar componentes celulares en función de la densidad. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué indica la tinción con azul tripán en la determinación de la viabilidad celular?

<p>La integridad de la membrana celular. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es importante controlar los niveles de CO2 en los incubadores de cultivo celular?

<p>Para influir en el pH del medio. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el principal inconveniente de utilizar cultivos celulares en virología para la producción de vacunas?

<p>Las células animales crecen más lentamente que los contaminantes. (B)</p> Signup and view all the answers

Si un laboratorio de cultivo celular experimenta una contaminación por micoplasmas, ¿cuál sería la forma más efectiva de detectarlos?

<p>Observación de gránulos oscuros en el citoplasma de las células. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Qué significa que una línea celular sea aneuploide?

<p>Presenta un número anormal de cromosomas. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el riesgo asociado a la realización de una cordocentesis para la obtención de sangre fetal?

<p>Alto riesgo de aborto. (D)</p> Signup and view all the answers

En un laboratorio de cultivo celular, ¿cuál es el primer paso fundamental para realizar un cultivo a partir de un tejido?

<p>Aislar y separar los diferentes componentes del tejido. (C)</p> Signup and view all the answers

Para la disgregación de células adheridas a una placa de cultivo, ¿cuál de los siguientes métodos es enzimático?

<p>Tratamiento con tripsina. (C)</p> Signup and view all the answers

En la determinación de la concentración celular utilizando una cámara de Neubauer, ¿qué volumen representa el área comprendida entre el cubreobjetos y la superficie marcada con la cuadrícula?

<p>0,1 microlitro. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de las siguientes opciones describe mejor el principal riesgo asociado con la amniocentesis?

<p>Aborto espontáneo. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo se realiza el control morfológico del cultivo celular?

<p>Mediante microscopio. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es fundamental el uso de soluciones salinas equilibradas en un medio de cultivo celular?

<p>Para disolver el resto de los componentes del medio. (B)</p> Signup and view all the answers

¿De qué manera un fallo en la adhesión al sustrato afecta a las células transformadas?

<p>Inhibe la proliferación celular. (C)</p> Signup and view all the answers

En un laboratorio de cultivo celular ¿qué tipo de radiación se utiliza comúnmente cuando no se está trabajando?

<p>Ultravioleta. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes describe mejor el propósito de la citogenética convencional?

<p>Estudiar los cromosomas obtenidos tras el cultivo celular <em>in vitro</em>. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Por qué es importante inducir químicamente la división celular in vitro antes del análisis cromosómico?

<p>Para obtener cromosomas metafásicos que son más fáciles de visualizar. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál de los siguientes procesos se considera una ventaja clave de los cultivos celulares en la investigación biomédica?

<p>La capacidad de controlar con precisión el entorno celular. (C)</p> Signup and view all the answers

En el contexto de la investigación en cultivos celulares, ¿qué representa la 'reproducción asistida' mencionada en el texto?

<p>Una aplicación de la reproducción y diferenciación celular. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es un desafío significativo asociado con el uso de cultivos celulares en comparación con la experimentación in vivo?

<p>La complejidad de mantener las condiciones estériles y evitar la contaminación. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Qué implicación tiene la aneuploidía en las líneas celulares, especialmente en las líneas celulares continuas?

<p>Velocidad de crecimiento alterada y capacidad de diferenciación afectada. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo afecta la pérdida de la organización espacial tridimensional en un cultivo celular a la investigación biomédica?

<p>Limita la validez del modelo <em>in vitro</em> al no reflejar la complejidad del tejido original. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es el objetivo principal de mantener la arquitectura característica del tejido in vivo en un cultivo de órganos?

<p>Mantener los tipos celulares diferenciados y replicar el tejido de origen. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es una limitación de los cultivos de órganos en comparación con otros tipos de cultivos celulares?

<p>Su propagación está limitada, restringiendo el crecimiento a la periferia. (C)</p> Signup and view all the answers

En relación con los cultivos primarios, ¿qué ocurre con la heterogeneidad celular a lo largo del tiempo?

<p>Disminuye a medida que se seleccionan los tipos celulares con mayor tasa de crecimiento. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué condición es un prerrequisito para que las células crezcan en cultivos en monocapa?

<p>La necesidad de anclaje al sustrato. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo contribuye la introducción de técnicas de fusión celular a la producción de anticuerpos monoclonales?

<p>Produce anticuerpos monoclonales de mejor calidad. (C)</p> Signup and view all the answers

Generalmente, ¿qué implicación tiene alcanzar la fase de senescencia en un cultivo celular?

<p>Pérdida gradual de la capacidad de dividirse y muerte del cultivo. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo afecta un control preciso del medio ambiente a la validez de los resultados en cultivos celulares?

<p>Mejora la reproducibilidad y fiabilidad de los resultados. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué papel juegan los inhibidores del crecimiento de contaminantes en el mantenimiento de un cultivo celular?

<p>Prevenir el crecimiento de microorganismos no deseados. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué se debe considerar al seleccionar el método de disgregación celular (mecánico o enzimático)?

<p>La naturaleza y cantidad del tejido disponible, y el uso previsto para las células. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué factores son esenciales para asegurar la asepsia en un laboratorio de cultivo celular?

<p>Uso de equipo estéril y técnicas adecuadas de manipulación. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo puede afectar la elección del suero utilizado en un medio de cultivo al crecimiento y supervivencia de las células?

<p>El suero suministra factores de crecimiento y otros componentes esenciales que influyen en el metabolismo celular. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cómo se monitorea adecuadamente el pH del medio?

<p>Utilizando un indicador de pH que registre cambios mínimos. (B)</p> Signup and view all the answers

¿Cuál es la importancia de la esterilización en un laboratorio de cultivo celular?

<p>Evitar microorganismos no deseados, manteniendo la asepsia del cultivo. (A)</p> Signup and view all the answers

¿Qué papel juega la tensión superficial en los cultivos?

<p>Afecta la adhesión y propagación celular. (C)</p> Signup and view all the answers

¿Cuándo se recomienda el uso de la biopsia coriónica?

<p>Cuando existe un alto riesgo de anomalía fetal. (B)</p> Signup and view all the answers

En las fases de crecimiento, ¿Cómo se describe la Fase Estacionaria?

<p>Tramo recto sin pendiente, número de células permanece constante. (D)</p> Signup and view all the answers

¿Qué ocurre si las células se contaminan con micoplasmas?

<p>Provocan la muerte o alteración en el crecimiento. (B)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

Conventional cytogenetics

Study of chromosomes from cells grown in vitro.

Cell culture definition

Allowing cells to grow in a controlled environment outside their natural habitat, maintaining their physiological, biochemical, and genetic properties.

Cancer related to cell culture

A disease resulting from uncontrolled cell proliferation.

Regenerative medicine

Restoring tissue function using cell transfer.

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Culture advantages for cell samples

Offers environment control, homogeneity, reduces tests/costs, and ethical advantages

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Cons of cell culture

Slower growth, needs asepsis, increased equipment, and potential instability.

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Organ culture

Maintains tissue architecture, limits growth

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Primary explants

Fragments adhering to a surface with cells proliferating.

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Cell culture cells

Dispersed cells growing as monolayer or suspension.

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Primary cultures

Cells directly from tissue with limited growth.

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Primary cell characteristics

Requires sub-culturing to proliferate.

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Monolayer cultures

Cells adhered to a surface.

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Suspension cultures

Cells dispersed in medium, anchorage-independent.

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Cells' properties changing

Loss of differentiated properties and division.

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Secondary cultures - cell lines

Continuous cell divisions with properties conserved.

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Senescence

When cells can't divide and die.

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Continuous cultures

Cells transform to grow indefinitely.

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Growth Curve cell phases

Curve illustrating cell concentration over time.

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Cell Cultivation

nutritious environments substituting the natural environment to grow cells.

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Asepsis

Free from contamination or risk of.

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Culture media provides

Nutritive and supporting a cellular environments.

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Growth inhibitors

Antibiotics and antifungals.

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The pH indicator.

Shows minimum changes in H+ concentration.

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Biological safety cabinets

An equipment to force air through a filter.

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Air Sterilizer

Inhibits the growth of pathogens.

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¿Qué se aprende en el laboratorio citogenético?

Técnicas para obtener cultivos celulares en laboratorios citogenéticos.

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¿Cómo se estudian los cromosomas?

Cultivo de células in vitro tras la división celular, visualización en metafase.

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¿Qué se obtiene in vivo?

Vellosidades coriónicas, médula ósea, tumores sólidos.

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¿Qué se obtiene in vitro?

Sangre periférica, biopsias, líquido amniótico.

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¿Qué detecta el cultivo celular?

Detectar aneuploidías y mutaciones génicas.

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¿Qué previene el ciclo celular?

Previene proliferación anormal o alteraciones cromosómicas.

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¿Qué estudia la virología en cultivo celular?

Establecimiento de condiciones para virus animales/plantas y producción de vacunas.

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¿Qué estudia la inmunología en cultivo celular?

Las técnicas de fusión celular en la producción de anticuerpos monoclonales.

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¿Qué estudia la ingeniería?

Producción de proteínas en líneas celulares.

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¿Qué factores se controlan?

Factores físico-químicos y fisiológicos controlados.

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¿Es costoso el cultivo celular?

El cultivo celular puede reducir el costo de los ensayos clínicos.

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¿Es ético el cultivo?

Alternativa en la experimentación con animales.

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¿Qué contamina el cultivo?

Hongos, levaduras, bacterias, micoplasmas.

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¿Cuanto cuesta producir?

10 veces menos costo, hasta 100g necesita incrementar instrumental.

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¿A qué afecta la inestabilidad?

Velocidad de crecimiento y capacidad de diferenciarse.

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¿De qué carece el modelo in vitro?

Carece de organización tridimensional, interacciones celulares y homeostasis in vivo.

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¿Qué mantiene el cultivo de órganos?

Se mantiene la arquitectura original del tejido.

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¿Qué pasa en los cultivos?

Las células pierden su capacidad de dividirse.

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¿Por qué son posibles?

Los cultivos celulares primarios son posibles por la propiedad de incapacidad de dividirse.

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¿Qué implica la línea celular?

Aumento de células, predominio de ciertos tipos, homogeneidad, conservación indefinida en nitrógeno.

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¿Qué define la vida finita?

Las líneas celulares tienen vida finita hasta el tiempo.

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¿Qué son continuas?

Células modificadas con crecimiento sin límite.

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¿Qué es fase estacionaria?

La fase donde el número de células permanece constante.

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¿De qué está hecho?

Equilibrio de sales, tampón, glucosa, aminoácidos, vitaminas, suero fetal.

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¿Qué hay que controlar?

Controlar el pH y las concentraciones de oxígeno y CO2.

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¿Qué función tienen los incubadores de CO2?

Mantiene la temperatura, la humedad y el contenido de gases como dióxido de carbono y oxígeno para el crecimiento celular.

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¿Qué utilidad tienen los microscopios?

Se utilizan para la observación y determinación de cultivos celulares, controlando su morfología.

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¿Qué función tiene el equipo de almacenamiento de soluciones?

Son esenciales para el almacenamiento de soluciones y células a temperaturas específicas.

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¿Qué hacen las centrífugas?

Se utilizan para acelerar la decantación o sedimentación de componentes en una muestra basándose en su densidad.

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¿Qué permite el autoclave?

Facilita la esterilización por calor de sólidos y líquidos.

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¿Para qué sirve el contador electrónico?

Se emplea para contar y medir la concentración de partículas en suspensión, tales como células.

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¿Por qué es importante el purificador de agua?

Esencial para garantizar la esterilidad y pureza del agua utilizada en la preparación de medios y aditivos.

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¿Qué función tienen los baños termostatizados?

Se utilizan para atemperar medios de cultivo y líquidos a la temperatura óptima para las células.

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¿Qué tan importante es lavar las manos?

Extrema importancia para evitar contaminaciones durante los experimentos y proteger al usuario.

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¿Cuál es el primer paso?

Aislar y separar los componentes del tejido, generalmente por métodos mecánicos o enzimáticos.

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¿Cuál es la muestra principal?

Incluye sangre periférica (glóbulos blancos), biopsias de piel o gónadas.

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¿Qué muestras son estudiadas?

Incluye líquido amniótico, vellosidades coriónicas, o sangre fetal del cordón umbilical.

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¿Qué alteran el cultivo?

Se refieren a la alteración del cultivo por microorganismos no deseados.

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¿Cómo se contaminan?

Las bacterias y las levaduras contaminan en corto tiempo, los hongos a largo plazo.

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¿Qué son los micoplasmas?

Microorganismos procariotas que pueden causar la muerte o alterar el crecimiento de los cultivos.

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¿Qué hacen las cabinas de bioseguridad?

Su función es mantener un área libre de partículas y contaminantes mientras se manipulan los cultivos.

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¿Qué se necesita atemperar?

Líquidos y medios se atemperan a la temperatura necesaria para proteger a las células.

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¿Qué es la fase estacionaria?

Es la fase donde el número de células permanece constante.

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¿Qué es un esterilizador de aire?

Dispositivos que garantizan que el aire entre en el ambiente esterilizado.

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¿Cúal es la definición de desechable?

Es eliminar aquello que ya no funciona.

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¿Qué es el cultivo de órganos?

Cultivo de células que conserva estructura tisular.

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¿Fase de latencia?

Fase inicial, sin crecimiento neto de células cultivadas.

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¿Fase exponencial?

Fase con rápido incremento en el número de células.

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¿Fase de senescencia?

Fase fin del cultivo celular, las células pierden la capacidad de proliferar y mueren.

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¿Soportes de cultivo?

Estructuras para cultivos celulares: vidrio o plástico.

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¿Qué contiene el medio?

Medio con sales, glucosa, y suero bovino.

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¿Que son los métodos mecanicos?

Es un tipo de cultivo en donde se realiza un raspado en la placa para remover las células adheridas.

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¿Qué es la forma mecánica?

Es el raspado de las muestras o cultivos.

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¿Qué son los métodos químicos?

Se efectúa con proteínas que se ubican en la matriz extracelular.

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¿Qué son los métodos enzimaticos?

Se efectua con soluciones activas utilizadas para el tratamiento del tejido.

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¿Conteo celular?

Técnica para contar la concentración de células en una suspensión.

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¿Azul de tripano?

Identifica células con membranas dañadas.

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Study Notes

  • Objectives include understanding cell culture methods, distinguishing cell sources, and learning cell counting techniques

Introduction

  • Conventional cytogenetics studies chromosomes from in vitro cell cultures
  • Cell division, especially at metaphase, allows individual chromosome identification under a microscope
  • Metaphase chromosomes obtained in vivo from mitotic tissues like chorionic villi, bone marrow, solid tumors
  • Can be obtained in vitro by chemically inducing division samples such as peripheral blood lymphocytes
  • Aneuploidies and genetic alterations (mutations) can be detected through cell cultures

Cell Culture Definition

  • Cell culture: techniques that maintain cells in vitro while preserving their physiological, biochemical, and genetic properties
  • Culture types vary (organ, explant, primary, secondary) based on tissue structure preservation and duration
  • In vitro cell culture is used in:
  • Cancer research: study of cell cycle diseases and abnormal proliferation
  • Reproduction and Cellular Differentiation: reproduction and differentiation of cells
  • Regenerative medicine: regeneration of tissues that have lost cell mass through cell transplantation

Research Areas Dependent on Cell culture

  • Virology: culturing animal and plant viruses, producing antiviral vaccines
  • Immunology: cloning antibodies
  • Protein engineering: producing proteins like interferon, insulin, and growth hormone in cell lines

Benefits of Cell Culture

  • Precise control over the environment by manipulating a variety of factors (pH, temperature, hormones, etc.)
  • Sample characterization and homogeneity are improved in cell lines with consistent morphologu and compositon
  • Cost-effective by reducing clinical trial expenses and using lower concentrations of reactives and drug
  • Reduce the number of lab animals required

Disadvantages of Cell Culture

  • Animal cell growth is slow
  • Need for sterility due to contamination risks and complex nutrient mixes
  • High production costs
  • Genetically unstable cell lines; can affect cell growth due to chromosomal changes changes

Validity of in vitro model is limited:

  • Lack of three-dimensional tissue organization
  • Missing interactions between cell types and the extracellular matrix
  • Systemic regulation components are absent

Types of Cell Culture

  • Organ Culture: Maintains tissue architecture in a nutrient-rich, 3D environment
  • Explant Cultures: Tissue fragments adhere to a surface where cells proliferate out from the edge
  • Cell culture: involves cellular disaggregation via with enzymes or mechanical means

Primary Cell Culture

  • Cultures prepared directly from tissues or organs
  • Original cell characteristics with the addition of new cell division
  • Need new support when proliferation inhibiting connections are formed

Cell Culture type differences include:

  • Monolayer Cultures: Cells adhere to a solid surface and require cellular proliferation
  • Suspension Cultures: Cells dispersed and can be hematopoyetic cells and do not need cellular proliferation

Secondary Cell Culture

  • Formed from successive cultures of cells
  • High cell numbers with one predominate cell over others
  • They are uniform and homogenous cell populations
  • Cells maintain features through successive phases and indefinite conservation by using liquid nitrogen

Cell line characteristics incluse:

  • Finite lifespan (20-100 divisions)
  • The cells will eventually undergo senescene and will continue to maintain tissue cell
  • They can have continuous transformation of cells

Transformed Cell Characteristics

  • Unlimited growth
  • Can grown independantly
  • Form tumor Growth
  • Can have chromosomal abnormalities

Cellular Culture Biology

  • Concentration of cells with the progression of a culture follows a growth curve with 3 stages

Germination

  • Initial 24 hours but there is no apparent growth during this time

Exponential Growth

  • The linear elevation of the culture is usually completed within 6-7 days

Stationary stage

  • There is no slope and occurs 6-7 days after initial culture stage

Senescence Phase

  • The ability for cell to proliferate diminishes

Cell Culture Composition

  • The goal is to provide an aseptic environment
  • Work should be in its own area with limited of contact from other lab workers

Cell Culture Equipment

  • Required for aseptic environment

Nutrient Culture includes:

  • Nutritious to substitue the cell natural biological needs
  • They are mixures

Physicochemical characteristics

  • Condition that allow of cell proliferation and growth to be successful

Substrates are:

  • Glass: easy to clean and sterilize
  • Inexpensive
  • Plastic: low in cost and disposable
  • Petri dishes always are a normal chioce

Medium :

  • Consists of an aqueous that balance with other compunds
  • Salt base
  • Inhibit growth
  • pH to support to cell health
  • Contains sugar for cell support
  • Amino based
  • Vitamins and hormones

Medium Features:

  • Reduce contaminents and support activities
  • Maintain pH baslance
  • Provide osmolarity

Key Culture Components

  • Oxygen and CO2 concentrations
  • Maintain consistent temperatures

Laboratory Equipment include:

  • Biologiucal safety cabinets
  • Protection using air flow

Incubators

  • Control temperature and humidity and carbon dixode and oxygen levels

Microscopes

  • Used to control cell state

Freezers

  • Cryogenic insulation is needed for Cell Freezer

Essential materials:

  • Fridges
  • Freezers

Essential instruments:

  • Nitorgen
  • Centrifuges
  • Autoclaves

Counters

  • Electrical equipement
  • Water filtration

Norms include:

  • Wash hands
  • UV light
  • Maintain Clean workplace
  • Keep Sterilization

Contaminents:

  • The bad growth condition

The types are:

  • Bacterias
  • Microplasmas

Cell culture removal:

  • Genetic clinical extraction

Diagnostics include:

  • Amniotic extraction from babies with genetic issues, where procedure occurs at 15-18 weeks gestation and entails low risk.
  • Vellositidades corionocas are used, they are taken 11-13 weeks and there is slightly increased risk around 0.5-1%. Usually only when the baby is expected have have serious defects
  • Cord blood extraction for genetic purposes and high risks

Testing

  • Morphology and Cell Cycle
  • Culture
  • DEnsity
  • Media selection

Cellular Disaggregation Methods

  • Mechanical methods use "scrapping" to aid in cell removal
  • Chemically reduces concentration to support protein interaction
  • Treated w/solutions to promote cell separation (proteases)

ENZYMATIC Technique

  • Labs typically use .01 to .5 Trip solution
  • Requires incubation by 37 degree setting

Infrastructure for cell culture. Independent areas for:

  • Preparation of culture media, sterilization of media and reagents, washing/sterilizing/preparation of equipment, functioning and use

Senescence Characteristics

  • The cells lose their dividing capability
  • The culture stops growth completely

Transformed cells characteristics

  • Cells are able to continuously grow in controlled environments
  • Cell grow with out assistance
  • Can create tumours
  • Present genetic abnormalities

Equipment Required:

  • Biological Cabin
  • Incubators containing CO2
  • Micrscopes
  • Freezers including cryogenic installation, refrigerators, and storage units containing liquid nitrogen (-196 °C)

Laboratory Equipment

  • Centrifuges, autoclaves,Electronic Cell counters, and water purification

Guidelines for work

  • Important to wash hands often and sterilize equipment
  • UV light
  • 70% Ethanol, do not pass over opened plates: Use uniquee tip/ pippet for avoid contaminations

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