Biologie - Primární protilátky a techniky

Podcast

Play an AI-generated podcast conversation about this lesson

Questions and Answers

Jaká je funkce bazolaterální interdigitace u buněk, které transportují vodu?

Zvyšuje povrchovou plochu pro absorpci živin

Zajišťuje mechaničtější stabilitu buněk

Umožňuje efektivnější výměnu iontů (correct)

Zvyšuje metabolickou aktivitu mitochondrií

Jaké struktury obsahuje centrosom a jakou mají funkci?

Obsahuje ribozomy pro syntézu proteinů

Obsahuje mitochondrie pro výrobu energie

Obsahuje centrioly, které organizují mikrotubuly (correct)

Obsahuje jádro pro replikaci DNA

Jaká je úloha bazálního labyrintu v buněčné struktuře?

Zvámi buněčné signály pro dělení buněk

Poskytuje energie pro transport iontů proti gradientu (correct)

Zajišťuje mechanickou podpůrnou funkci buněk

Reguluje metabolismus lipidů v buňkách

Jaký je průměr centriolu v mikrometrech?

0,2 mikrometru Signup and view all the answers

Jaký je rozdíl mezi euchromatinem a heterochromatinem?

Euchromatin je méně kondenzovaný a obvykle aktivní v transkripci. Signup and view all the answers

Co se děje s centrosomem během fáze replikace DNA?

Centrosom se zdvojuje a každá část obsahuje pár centriolů Signup and view all the answers

Jaké složení má nukleosom?

Skládá se z oktamerového jádra tvořeného 8 histony a DNA ovinuté kolem něj. Signup and view all the answers

Co se děje v profázi buněčného dělení?

Chromatinové vlákna se kondenzují do chromosomů. Signup and view all the answers

Jakým způsobem jsou chromatinové vlákna zakotvena do chromosomové matrice?

Jsou zakotvena do kostry složené z nehistonových proteinů. Signup and view all the answers

Jaký je hlavní úkol jádra v eukaryotických buňkách?

Zajištění autoreprodukce, diferenciace a funkce. Signup and view all the answers

Jaký je hlavní rozdíl mezi přímou a nepřímou metodou imunohistochemie?

Nepřímá metoda zahrnuje krok s neznačenou primární protilátkou. Signup and view all the answers

Který roztok se často používá při fixaci tkáně pro elektronovou mikroskopii?

Formaldehyd. Signup and view all the answers

Jaká je hlavní funkce avidin-biotin komplexu v trojstupňové metodě?

Umožnit identifikaci míst primární specifické reakce. Signup and view all the answers

Kdo přispěl k buněčné teorii v první polovině 19. století?

T.Schwann, M.J.Schleiden a J.E. Signup and view all the answers

Jaký je princip barvení při použití toluidinové modři?

Zvýšení kontrastu polotenkých řezů pro mikroskopii. Signup and view all the answers

Jaké druhy pryskyřic se používají při zalévání vzorků pro elektronovou mikroskopii?

Epoxidové a metakrylátové. Signup and view all the answers

Kolik molekul biotinu dokáže vázat jedna molekula avidinu?

4 molekuly. Signup and view all the answers

Jaký je účel použití mikrotomu při přípravě vzorků pro elektronovou mikroskopii?

Získat tenké řezy pro barvení. Signup and view all the answers

Study Notes

Imunohistochemické metody

Primární protilátka se aplikje s navázanou značkou; užitečná pro elektronovou mikroskopii, ale ne pro světelnou.
Nepřímá metoda zahrnuje sendvičovou techniku, kdy se na antigen naváže neznačená primární protilátka a na její Fc fragment se naváže značená sekundární protilátka.
Trojstupňová nepřímá metoda využívá komplex avidin-biotin (ABC), kdy avidin váže biotin a následně se sekundární protilátka váže na tento komplex označený peroxidázou.

Elektronová mikroskopie

Odběr vzorku z čerstvé tkáně (cca 1 mm³).
Fixace, často dvojitá, pomocí aldehydových roztoků jako formaldehyd či glutaraldehyd.
Zálivání do umělých pryskyřic, jako epoxidové, metakrylátové.
Krájení na polotenké a ultratenké řezy (40-60 nm) pomocí mikrotomu, zachycení na síťkách (měděné, niklové, zlaté) s uhlíkovou vrstvou.

Buněčná teorie a struktura buňky

Buňka (cellula) je nejmenší stavební a funkční jednotka schopná samostatného života, poprvé popsána Robertem Hookem v roce 1665.
Klíčoví vědci T. Schwann a M. J. Schleiden přispěli k buněčné teorii v 19. století, která uvádí, že všechny organismy se skládají z buněk.
Interdigitace – vyčnívající výběžky jedné buňky zapadají do prohlubní jiných buněk, u buněk transportujících vodu.
Bazální labyrint – záhyby buněčné membrány obsahující mitochondrie pro energetickou produkci iontových pump.

Buněčné organely a jejich funkce

Centrosom je hlavní MTOC většiny buněk, blízko jádra, obsahuje centrioly skládající se z 9 tripletů mikrotubulů.
Centrioly se zdvojují během replikace DNA, kolmo uspořádané v interfázi.
Jádro je obklopeno jadernou membránou, obsahuje genetickou informaci, kterou tvoří chromatin, jadérko a jaderný obal.

Struktura DNA a chromatin

DNA se skládá ze dvou polynukleotidových řetězců uspořádaných do dvoušroubovice.
Nukleosom je stavební jednotkou chromatinu, tvořen 8 histony a dvakrát ovinutou molekulou DNA.
Segment DNA s histonem H1 tvoří spojnici mezi nukleosomy, což vytváří chromatinovou fibrilu o průměru 30 nm.
Heterochromatin a euchromatin se liší podle stupně kondenzace, chromatin se v profázi kondenzuje do chromosomů.

Studying That Suits You

Use AI to generate personalized quizzes and flashcards to suit your learning preferences.

Description

V tomto kvízu se zaměříme na aplikaci primárních protilátek a jejich využití ve světelné a elektronové mikroskopii. Prozkoumáme výhody a nevýhody různých metod, včetně sendvičové techniky. Otestujte své znalosti v oblasti imunologie a technik biologického výzkumu.