Biologia Molecular: EPCR e Desenho de Primers

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Questions and Answers

Qual é o processo que permite conhecer diretamente o transcrito que está sendo produzido?

  • PCR
  • Análise de MRNA (correct)
  • Transformação de cDNA
  • Eletroforese em gel agarose

Qual é o propósito da nested-PCR?

  • Medir a resistência
  • Amplificar genes com tamanho difícil
  • Verificar a presença de fusão
  • Confirmar resultados de PCR (correct)

Como é possível identificar a translocação específica?

  • Analisando o produto de fusão (correct)
  • Utilizando PCR
  • Medindo a resistência
  • Verificando a conformação da cromatina

O que é necessário para confirmar a presença de fusão?

<p>Nested-PCR (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é o fator que altera a velocidade de migração no gel de agarose?

<p>Voltagem aplicada (B)</p> Signup and view all the answers

Como é possível medir a resistência?

<p>Utilizando eletroforese em gel agarose (A)</p> Signup and view all the answers

O que é necessário para discriminar conformação linear e circular?

<p>Eletroforese em gel agarose (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é o propósito da transformação de cDNA?

<p>Converter mRNA em DNA (C)</p> Signup and view all the answers

O que é necessário para monitorizar a resposta terapêutica?

<p>Malha para monitorizar (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o fator que influencia a resolução de eletroforese em gel agarose?

<p>Concentração de agarose (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o cofator da polimerase?

<p>Magnésio (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é o volume do tampão utilizado?

<p>10 mL (A)</p> Signup and view all the answers

Quantas amostras foram utilizadas?

<p>5 amostras (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é a concentração do tampão?

<p>10X (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é o papel do magnésio na reação?

<p>Cofator da polimerase (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o nome da enzima utilizada?

<p>Polimerase (D)</p> Signup and view all the answers

Qual é o resultado esperado da reação?

<p>Síntese de DNA (C)</p> Signup and view all the answers

Qual é o tipo de análise realizada?

<p>Análise de conformação de cromatina (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o papel do tampão na reação?

<p>Manutenção do pH (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é o objetivo da reação?

<p>Síntese de DNA (C)</p> Signup and view all the answers

Qual é o método mais adequado para avaliar a quantidade de transcritos de fusão em uma amostra?

<p>Multiplex RT-PCR (B)</p> Signup and view all the answers

O que é necessário para confirmar a fusão de genes em uma amostra?

<p>Uma reação de PCR nested (D)</p> Signup and view all the answers

Qual é o objetivo principal da monitorização em tempo real durante a PCR?

<p>Detecção de transcritos de fusão (A)</p> Signup and view all the answers

Qual técnica é mais sensível para detectar mutações em uma amostra?

<p>Sequenciação de Sanger (B)</p> Signup and view all the answers

Como é denominado o produto de uma reação de PCR?

<p>Amplificon (A)</p> Signup and view all the answers

Qual é o objetivo da análise de translocação?

<p>Identificar a localização de um gene (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o método mais apropriado para medir a resistência a um fármaco?

<p>Aquisição de mutações (B)</p> Signup and view all the answers

Qual é o fator que influencia na resolução da análise de translocação?

<p>A qualidade do DNA (A)</p> Signup and view all the answers

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Study Notes

Biologia Molecular: EPCR

  • ABL e BCR são genes de fusão utilizados em estudos de Biologia Molecular.

Primers

  • Os primers devem ser desenhados de forma a serem passíveis de amplificação do gene de fusão.

Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)

  • A transformação do RNA em cDNA é o material usado em PCR.
  • A PCR é dividida em duas etapas: anídase e elongação.

Nested-PCR

  • A Nested-PCR é uma técnica que amplifica uma região específica do DNA.
  • Ela é usada para confirmar resultados e evitar contaminações.

Eletroforese

  • A eletroforese é utilizada para separar fragmentos de DNA com base em seu tamanho e carga.
  • O gel de agarose é usado para separar os fragmentos de DNA.

Identificação de Transcritos

  • A identificação de transcritos é feita através da medição da expressão gênica.
  • A análise do mRNA permite conhecer diretamente o transcrito que está sendo produzido.

RT-PCR (Multiplex)

  • A RT-PCR é usada para avaliar a expressão gênica em tempo real.
  • Ela é uma técnica sensível e específica para detectar transcritos de fusão.

Sequenciação

  • A sequenciação é utilizada para identificar mutações em genes.
  • A sequenciação de Sanger é uma técnica utilizada para sequenciar DNA.

Componentes de PCR

  • Os componentes de PCR incluem RNA, primers, dNTPs, buffer e polimerase.
  • O buffer é importante para conferir condições ótimas de funcionamento da polimerase.

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