生物化学实验课程简介

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Questions and Answers

以下哪项描述最准确地概括了《生物化学实验》课程在生命科学专业中的作用?

  • 它是理论教学的深化和补充,既有较强的实践性,又能强化学生对生物化学理论知识的理解。 (correct)
  • 它主要介绍生命科学的基本理论,而不太侧重于实践。
  • 它是一门独立的实践课程,与生物化学的理论知识完全脱节。
  • 它主要教授生物化学分离、制备分析和鉴定技术,对理论知识的理解没有帮助。

在进行生物化学实验时,以下哪种做法是不符合实验室安全操作规范的?

  • 使用浓酸时,直接用口吸取,以确保操作的精确性。 (correct)
  • 离开实验室时,检查水、电、煤气开关,并锁好门窗。
  • 发现电器设备漏电时,立即停止使用该设备。
  • 进入实验室前,了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。

实验室发生火灾时,以下哪种处理方式是不正确的?

  • 金属钠着火时,可把沙子倒在上面灭火。
  • 酒精及其他可溶于水的液体起火时,可用水灭火。
  • 在可燃液体燃着时,用湿棉布或沙土扑灭。 (correct)
  • 立即切断室内一切火源和电源。

如果实验中不慎被玻璃割伤,以下哪项处理措施是首要的?

<p>检查伤口内有无玻璃或金属碎片。 (D)</p> Signup and view all the answers

以下哪种关于绝对误差和相对误差的说法是正确的?

<p>当被称量物体的重量较大时,相对误差较小,称量的准确度较高。 (D)</p> Signup and view all the answers

以下哪种措施不能有效减少偶然误差?

<p>使用精密的仪器和试剂。 (C)</p> Signup and view all the answers

在分析测定工作中,以下哪种做法有助于减少系统误差的影响?

<p>对测量仪器进行预先的校正。 (D)</p> Signup and view all the answers

准确度与精确度之间的主要区别在于:

<p>准确度的大小主要决定于测定的系统误差;精确度的大小主要决定于测定的偶然误差。 (C)</p> Signup and view all the answers

进行实验记录时,以下哪项要求是不必要的?

<p>使用铅笔记录数据,方便修改。 (B)</p> Signup and view all the answers

在一份完整的实验报告中,讨论部分的主要作用是什么?

<p>以实验结果为基础进行逻辑推论和分析。 (C)</p> Signup and view all the answers

在总糖的测定中,以下哪项陳述是蒽酮比色法的原理?

<p>糖类与硫酸反应生成有色化合物,通过比色定量。 (A)</p> Signup and view all the answers

制作蒽酮比色法测定总糖的标准曲线时,应注意哪些问题?

<p>确保所有试剂的纯度。 (D)</p> Signup and view all the answers

若RNA样品在紫外光谱分析中,A260/A280比值明显低于1.8,这通常提示样品存在什么污染物?

<p>蛋白质或酚类物质。 (A)</p> Signup and view all the answers

以下哪个选项描述了考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理?

<p>考马斯亮蓝与蛋白质中的碱性氨基酸结合,最大吸收峰发生改变,形成蓝色复合物。 (A)</p> Signup and view all the answers

使用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量时,为何宜在特定时间范围内(2 min ~ 1h)进行比色?

<p>蛋白质-考马斯亮蓝复合物在此时间内最稳定。 (A)</p> Signup and view all the answers

在测定蛋白质的等电点时,以下哪个现象可以作为判断依据?

<p>在特定 pH 值下,蛋白质沉淀量达到最大值。 (A)</p> Signup and view all the answers

在进行醋酸纤维薄膜电泳时,以下哪种因素会影响蛋白质的分离效果?

<p>电泳溶液pH。 (A)</p> Signup and view all the answers

Flashcards

生物化学实验

理论教学的深化和补充, 具有较强的实践性,是重要的实验基础课。

实验室纪律

保持室内安静,不大声谈笑,遵守实验室各项规定。

使用煤气灯

灯焰大小和火力强弱应根据实验需要调节,谨防失火。

易燃液体倾出

立即关闭所有的火源和电加热器,开启小窗通风。

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导线着火

应该切断电源或用四氯化碳灭火器。

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玻璃割伤

应迅速检查伤口内有无玻璃碎片,用硼酸水洗净,涂擦碘酒。

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准确度

测定值与真实值相接近的程度。

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精确度

在相同条件下,进行多次实验的测定值的程度。

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系统误差

由于测定过程中某些经常发生的原因所造成的误差。

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偶然误差

来源于某些难以预料的偶然因素,或测定过程中不易控制的外界因素的影响。

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标准物对照

在任何测试中,使用待测物质的标准溶液,对方法的准确度进行检查。

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蒽酮比色法

样品中可溶性糖类的总量

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葱酮比色法原理

糖类分子通过葱酮试剂在特定条件下生成有色化合物的原理进行定量分析

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纸层析法

以滤纸为载体分离氨基酸,比较未知物与已知物的 Rf 值来鉴定。

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考马斯亮蓝法

生物材料中蛋白质含量的测定方法。

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考马斯亮蓝法原理

基于蛋白质与考马斯亮蓝染料结合从而产生颜色变化进行定量分析

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等电点

蛋白质在特定pH值时表现出的既不带正电也不带负电的状态。

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电泳技术

在外电场作用下,利用支持介质分离带电颗粒的技术。

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琼脂糖凝胶电泳

由于其操作简单、快速、灵敏等优点,是分离、鉴定和纯化的一种有效方法。

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CTAB

一种阳离子去污剂,能与细胞膜上的蛋白质结合

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Study Notes

《生物化学实验》课程简介

  • 《生物化学》课程主要介绍生命大分子的结构、功能、物质合成与代谢等生命科学基础理论知识。
  • 《生物化学实验》是对理论教学的深化与补充,具实践性,是重要的实验基础课。
  • 学生需掌握生物化学实验的基本知识和技术技能,包括生物化学分离、制备、分析和鉴定技术(如滴定、比色、层析、电泳技术)以及各种仪器的使用。
  • 随着生物化学的发展,需了解并掌握较新的和实用的技术技能。
  • 通过这门课程,旨在巩固并加深生物化学理论知识,培养学生分析问题、解决问题以及设计和创新能力,并培养科学研究能力和严谨的科学态度。
  • 高质量的实验对提升生命科学相关专业学生的实验技能,强化理论知识的理解至关重要。

参考书目

  • 陈均辉, 李俊.生物化学实验(第五版)[M].北京:科学出版社,2015.
  • 祝顺琴, 刘万宏.生物化学实验教程[M].重庆:西南大学出版社,2022.
  • 朱圣庚, 徐长法.生物化学(第四版)[M].北京:高等教育出版社,2017.
  • 烟台大学生物化学教研室编.生物化学实验讲义.

生物化学实验室规则

  • 每个学生应自觉遵守课堂纪律,维护课堂秩序,准时,保持安静,并服从教师指导并遵守各项规章制度。
  • 实验前,学生应预习内容,熟悉实验目的、步骤,并了解仪器的使用方法。
  • 听从指导,按操作规范进行,实验结果和数据需准确记录,完成后经教师同意后方可离开,课后编写简要报告。
  • 实验台面保持整洁,仪器药品摆放整齐,试剂用后及时归位,防止药品洒落,实验完毕需清洁仪器和台面
  • 药品试剂需节约使用,保持纯净,防止污染,小心操作仪器,防止损坏,精密仪器需按规程使用,发现问题报告老师。
  • 注意安全,实验室内禁止吸烟,易燃溶剂远离火焰,不得接触有毒试剂,有害气体在通风橱内操作。
  • 实验后有毒液体回收到废液桶,固体废物倒入垃圾桶,不能倒入水槽。
  • 仪器损坏及时报告并登记,未经批准不得将实验室内物品带出,借出需办理手续。
  • 每次由值日生维护实验室卫生和安全。
  • 如对实验有疑问可提出意见,对反常现象进行讨论并提出看法,做到生动学习。

实验室安全及防护知识

  • 生物化学实验室常接触有毒、腐蚀、易燃、易爆化学品,可能使用易碎的器皿,及高温电热设备,因此安全至关重要。
  • 进入实验室前,应了解总阀门、电闸,并确保离开时所有开关都关闭,门窗锁好。
  • 使用煤气灯时,灯焰和火力应根据需求调节。使用设备时,需注意安全,不可用湿手触碰电器。
  • 使用浓酸或浓碱时需小心,防止溅出。取用试剂需使用洗耳球,溅出需及时清理和治疗。
  • 使用易燃品需特别小心,远离火源,倾倒液体需在火焰熄灭后,若倾出大量易燃液体,应立刻关闭火源和通风,用湿布擦拭。
  • 使用油浴时,应小心加热。废液,特别是强酸强碱,不能直接倒入水槽。
  • 发生火灾时应保持冷静,首先切断电源,再根据情况使用石棉布、沙土或水等灭火物。

实验室安全守则细则

  • 应知晓煤气和水总阀位置和电闸位置。
  • 调节火焰大小,做到人走火灭。
  • 用电器时防止触电,应用电笔测试。
  • 用洗耳球吸取试剂。要了解易燃物品的处理。
  • 强酸强碱不能直接倒入水槽。

实验室灭火方法

  • 覆盖可燃液体,隔绝空气,轻拿轻放防打翻。
  • 酒精等可用水灭火,有机溶剂用湿布或沙土,金属钠用沙子。
  • 电器火灾需切断电源。

实验室急救措施

  • 首要任务是恰当应对受伤事故。
  • 玻璃割伤需检查伤口,用硼酸水清洗,涂抹药剂,伤口过大需扎紧并送医。
  • 烫伤时涂抹药膏,一级灼伤擦橄榄油或酒精,二级不要弄破水泡,三级需包扎送医。
  • 皮肤接触强碱时,大量冲洗后用硼酸液,接触强酸时需用碳酸氢钠/氢氧化钾清洗。
  • 酚类烧伤用酒精清洗,煤气中毒需呼吸新鲜空气并送医。
  • 水银中毒对症下药,触电先切断电路,保证自身绝缘。

实验误差与提高实验准确度的方法

实验误差

  • 生化分析中,因分析方法、仪器及操作者等限制,测量值与客观值难完全一致,产生误差。
  • 分析者应对测定结果进行评估,判断准确度和可靠性,找出误差原因并减少误差,使结果准确反映组分含量。

准确度和误差

  • 准确度指测定值与真实值的接近程度;误差愈小愈准确。
  • 绝对误差:测定值与真实值之差 (∆N = N - N')。
  • 相对误差:绝对误差在真实值中所占百分率 (相对误差 (%) = (∆N / N') × 100%)。
  • 应使用相对误差来表示分析结果的准确度,但实际工作中只能用精确度来评价。

精确度和偏差

  • 精确度指相同条件下多次测定结果的程度。
  • 偏差用于分析结果的精确度。
  • 绝对偏差:测定值与算术平均值之差。
  • 相对偏差:绝对偏差与算术平均值之比。
  • 亦可用平均绝对偏差和平均相对偏差表示结果。

误差来源

  • 所有测量都可能产生误差,需了解来源。
  • 分为:系统误差 (可测误差) 和偶然误差 (随机误差)。

系统误差

  • 由某些经常发生的原因造成,对结果有稳定影响,使测定值偏高或偏低,且大小有规律,可测定或理论上可测。
  • 来源包括方法误差、仪器误差、试剂误差和个人操作误差。

偶然误差

  • 由某些难以预测的偶然因素、或不易控制的外界因素影响;大小正负不定。
  • 为减少偶然误差,可平均取样,多次取样。

提高实验准确度的方法

  • 提高分析结果的准确度需减少系统/偶然误差。
  • 减少系统误差方法:
    • 标准物对照:保证数据落在真实值范围。
    • 设置空白试验:以消除试剂杂质干扰等系统误差。
    • 校正仪器:减小仪器不准确引起的误差。

准确度、精确度和误差的关系

  • 精确度主要取决于测定中的偶然误差;准确度的大小则主要取决于测定的系统误差。测量次数越多,平均值也会越接近真实值。

实验记录

  • 记录实验结果是教学的必要环节。
  • 实验前预习确保理解原理和操作步骤,了解实验相关的流程和数据记录的表格
  • 现象和测试数据应及时记录,不能靠记忆,避免草率简记
  • 记录务必根据仪器的精确度准确记录数值
  • 详细描述实验条件,包括生物材料,选用的主要仪器,化学试剂等

实验报告

  • 实验报告用于总结实验过程和结果。
  • 通过对实验的复述,需要了解相关的理论,以及学习撰写研究论文的过程
  • 书写实验报告需涵盖: 实验名称和目的, 实验原理/步骤, 涉及试剂, 实验结果, 和讨论
  • 实验方法步骤的描述要简洁明了,也要方便重复

表格

  • 最好用图表概括实验结果,设计表格要求紧凑简明,有时需接标题详细说明,并使用单位

图解

  • 报告中可绘制草图、图线或流程图,确保数据更容易、更清晰地呈现在报告中

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